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目的：(1) 分离兔骨MSCs，体外培养扩增，观察其生物学性状及条件培养下成骨分化情况。(2) 提取hBMP-2 cDNA，构建其真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP2。(3) 将pIRES2-EGFP-hBMP2转染兔MSCs，观察hBMP-2 cDNA在兔MSCs的表达情况及其诱导成骨情况，探讨其作用机制。 方法：(1) 抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液，密度梯度离心法分离出MSCs，体外纯化鉴定培养扩增，相差显微镜下观察细胞的生物学性状。取第2代MSCs在条件培养基下成骨诱导，测定其ALP活性及成骨矿化情况。(2) RT-PCR方法获取人骨肉瘤细胞中的hBMP-2 cDNA，将此片段重组到pMD18-T克隆载体中，转化大肠杆菌DH5 α筛选扩增，并测序目的基因；酶切pMD18T-BMP2中的hBMP-2 cDNA，定向克隆到pIRES2-EGFP真核表达载体中，筛选扩增并鉴定重组质粒。(3) 用电穿孔法将pIRES2-EGFP-hBMP2转染至兔MSCs中，荧光显微镜下及流式细胞学检查观察转染效果、检测转染效率，定量RT-PCR方法观察hBMP-2 cDNA在兔MSCs中的转录情况，免疫组织化学及western blot方法检测MSCs中hBMP-2蛋白表达情况。连续培养转染后的兔MSCs，检测ALP活性及成骨矿化情况，观察表达的hBMP-2蛋白功能情况。 结果：(1) 兔MSCs为均一的成纤维形细胞，漩涡状贴壁生长，增殖成力强。在条件培养基中培养，兔MSCs具有向成骨细胞表型分化能力，细胞内ALP活性明显增强，可在两周时形成钙化结节。(2) 从人骨肉瘤细胞中提取到hBMP-2 cDNA，经测序后证明为hBMP-2基因全编码序列，并成功地构建hBMP-2 cDNA的真核表达载体。(3) 电穿孔方法可以将质粒pIRES2-EGFP-hBMP2转染至兔MSCs中，荧光显微镜下观察到强绿色荧光蛋白表达，流式细胞仪检测转染效率为(42.7±2.1)％。在转染24小时后定量RT-PCR方法可以检测到hBMP-2 cDNA在兔MSC中的逆转录片