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脂肪肝病是奶牛常见的营养代谢性疾病，是困扰奶牛养殖业的一大难题。目前，奶牛脂肪肝的发病机制尚未明确。为了探讨这一问题，本研究通过葛根和决明子联合应用处理奶牛肝细胞，通过NF-κB和CYP450的表达，在细胞和分子水平探讨奶牛脂肪肝的发病机制，为奶牛脂肪肝的防治提供依据。 本试验通过胶原酶两步灌流法获取奶牛脂肪肝细胞，葛根和决明子处理，生化法测定肝细胞中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的活性，ELISA法测定细胞色素P450酶(CYP450)、肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)的浓度，Western Blot法检测肝细胞中核因子-κB(NF-κB)蛋白的表达水平。 结果显示，2h后肝细胞附着于底壁，呈卵圆状，6h后肝细胞少量漂浮，轮廓明显，12h后个别细胞内出现空泡，体积增大，24h后有细小的伪足出现，36h后细胞呈岛屿状连接。油红“O”染色后可见肝细胞内大量染料侵染。 葛根处理24h后，50、100、150μg/mL葛根均能降低AST、ALT、TG、TC、MDA、TNF-α、CYP450的活性或含量，提高SOD的活性(P＜0.05或P＜0.01)。处理48h后，50、100、150μg/mL组葛根均能降低AST、ALT、TG、TC、MDA、CYP450的活性或含量，提高SOD的活性(P＜0.05或P＜0.01)，10、50、100、150μg/mL组葛根能降低TNF-α的浓度(P＜0.05或P＜0.01)。 决明子处理24h后，50、100、150μg/mL组决明子均能降低AST、ALT、TG、TC、MDA、TNF-α、CYP450的活性或含量，提高SOD的活性(P＜0.05或P＜0.01)。处理48h后，50、100、150μg/mL决明子均能降低AST、ALT、TG、TC、MDA、TNF-α、CYP450的活性或含量，提高SOD的活性(P＜0.05或P＜0.01)。 葛根和决明子联合用药处理奶牛脂肪肝细胞24h、48h后，各组均能够显著降低AST、ATL、TG、TC、MDA、TNF-α和CYP450的活性或含量，提高SOD的活性（P＜0.05or P＜0.01），其中50μg/mL葛根和50μg/mL决明子配比，改善程度优于其他联合用药组数据。 Western Blot结果显示，葛根处理24h后，各浓度对NF-κB的表达无明显变化;处理48h后，当葛根浓度为50μg/mL时，NF-κB的表达逐渐减弱。决明子处理24h后，各浓度对NF-κB的表达无明显变化;处理48h后，当决明子浓度为50μg/mL时，NF-κB的表达逐渐减弱。葛根和决明子联合处理24h、48h后，各组均对NF-κB的表达起到明显抑制效果，其中50μg/mL葛根和50μg/mL决明予配比，抑制效果最为明显。 结论:经胶原酶二步灌流法获得的肝细胞，存活率可达87％左右。葛根和决明子联合用药，使NF-κB和CYP450的表达量降低，并能够显著降低脂肪变性肝细胞中AST、ALT、TG、TC、MDA、TNF-α的活性或含量，提高SOD的活性。50μg/mL葛根和50μg/mL决明子联合用药时效果最佳，能大大降低脂肪变性对肝细胞所造成的危害。