【摘 要】
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目的:1.研究不同糖代谢状态人群的血管紧张素1-7(Ang 1-7)、血管紧张素转换酶(ACE)2水平,探讨其在糖尿病及其并发症中的作用。2.制备糖尿病肾脏模型,观察糖尿病大鼠肾脏病变
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目的:1.研究不同糖代谢状态人群的血管紧张素1-7(Ang 1-7)、血管紧张素转换酶(ACE)2水平,探讨其在糖尿病及其并发症中的作用。2.制备糖尿病肾脏模型,观察糖尿病大鼠肾脏病变和评价Ang 1-7对糖尿病大鼠肾脏内质网应激和凋亡的影响。方法:选取2014年12月于天津市海滨人民医院95名体检人员为研究对象,所有受试者均进行口服葡萄糖耐量试验,参照《中国2型糖尿病防治指南2010》2型糖尿病诊断标准:空腹血糖≥7.0mmol/L,餐后血糖≥11.1mmol/L。血糖异常患者包括空腹血糖受损(空腹血糖介于6.1~7.0 mmol/L)和餐后血糖调节受损(餐后2 h血糖介于7.8~11.1 mmol/L)的患者。根据血糖水平分为正常组(n=31)、糖耐量异常组(n=32)和糖尿病组(n=32)。检测其体重、腰围、血压、肝、肾功能、血脂水平、Ang 1-7、血管紧张素转换酶(ACE)2等指标,评价三组患者Ang 1-7水平及与血糖的关系,进一步应用多因素非条件Logistic回归分析影响血糖的危险因素。选择20只体重在150-200g之间的健康雄性SD大鼠,随机选择15只给予高脂饲料喂养,余下5只给予正常饲料饲养。8周后,给予15只高脂饲养大鼠禁食12小时(过夜禁食,不禁水),通过腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,5只健康鼠作为对照组给予注射相当体积的柠檬酸缓冲液。结果,11只成2型糖尿病模型,死亡3只,1只未成模。将糖尿病大鼠随机分为两组,一组给予Ang 1-7(576 ng/d)药泵干预,为Ang 1-7组,5只。另外一组泵入相当体积生理盐水,为糖尿病组,6只;2周后处死所有大鼠,留取肾脏标本。留取血、尿标本检测血肌酐和24小时尿蛋白。Western印迹和实时荧光定量PCR检测分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP78),增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和转录活性因子4(ATF4)水平。Western印迹和免疫组化检测大鼠肾组织凋亡情况。结果:不同血糖水平人群研究结果显示,糖耐量异常组和糖尿病组甘油三酯、ACE2、Ang 1-7水平与对照组相比明显升高;糖尿病组较对照组组明显升高(p<0.017),(TG:3.4±0.9 v.s 1.5±0.8,ACE2:28.6±4.7 v.s 21.8±4.2,Ang 1-7:14.4±4.2 v.s 11.0±3.5);进一步多因素非条件Logistic回归分析显示,ACE2和Ang 1-7是空腹血糖的独立危险因素。Western印迹结果显示,糖尿病组大鼠肾脏组织的内质网应激标志蛋白(GRP78、ATF4和CHOP)水平明显升高,与正常组相比,其差异有统计学意义(p<0.05);与糖尿病组相比,Ang 1-7组网应激标志蛋白水平明显下降,其差异有统计学意义(p<0.05)。Western印迹和免疫组化显示Ang 1-7组肾组织caspase 3的表达较糖尿病组明显降低。结论初诊糖尿病患者Ang 1-7水平保护性升高,Ang 1-7可抑制糖尿病大鼠肾脏内质网应激和凋亡。
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