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第一部分1型糖尿病伴甲状腺自身免疫的前瞻性研究目的：探讨自身免疫性(1A型)、特发性(1B型)1型糖尿病及成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者合并甲状腺自身免疫的临床特征及影响因素。设计：病例-对照前瞻性研究。方法：对120例1A型、77例1B型糖尿病及130例LADA患者进行甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、血清uTSH检测。采用放免法检测TPO-Ab、TG-Ab,直接化学发光法检测uTSH,放射配体法检测谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)。对三组患者随访观察,平均4年后再次复查。结果：1.1A型糖尿病患者在基线TPO-Ab及TG-Ab阳性率分别为27.5%、28.3%,均高于1B型糖尿病患者(14.3%、11.7%,P均<0.05),而TPO-Ab检出率与LADA患者无显著差异(18.5%)。随访后1A型糖尿病患者TPO-Ab及TG-Ab阳性率升至30.8%、30.0%,均高于1B型糖尿病患者(15.6%、12.9%)及LADA患者(20.0%、17.7%,P均<0.05)。2.与甲状腺自身抗体阴性者相比,甲状腺自身抗体阳性1A型糖尿病患者随访前后高滴度GADA(GADA≥0.3)所占比例较高(69.8%vs40.2%和58.1%vs33.8%P均<0.05),更易有甲状腺疾病家族史及甲状腺肿大俨：均<0.05)。3.甲状腺自身抗体阳性的1B型糖尿病与抗体阴性者相比,女性占优势(71.4%vs30.2%,P<0.05),起病年龄较小,BMI、空腹及餐后两小时C肽均较低(P均<0.05),临床特征更倾向于1A型糖尿病。4.与甲状腺自身抗体阴性者相比,甲状腺自身抗体阳性的LADA患者女性多见(58.9%vs35.4%,P<0.05),高滴度GADA所占比例在随访前后均较高(58.8%vs25.0%和52.9%vs25.0%,P均<0.001)。甲状腺自身抗体阳性的LADA患者随访后空腹及餐后C肽均低于甲状腺自身抗体阴性者(P均<0.05)。5. LADA1(GADA≥0.3)患者TG-Ab、TPO-Ab的阳性率在随访前后均高于LADA2 (0.05≤GADA<0.3)及1B型糖尿病患者(P均<0.05),而与1A型糖尿病患者无显著差异。6. Logistic回归分析显示入组时甲状腺自身抗体阳性均是1A、1B型糖尿病及LADA患者将来发生甲状腺功能异常的危险因素(OR值分别为8.272、6.5及4.045,P均<0.05)。结论：1.1A型糖尿病和LADA1患者发生甲状腺自身免疫紊乱的风险高于LADA2和1B型糖尿病患者。LADA1也可作为自身免疫多内分泌腺病综合征(APS)的重要组成成分。2.高滴度GADA阳性或女性是1A、1B型糖尿病及LADA患者发生甲状腺自身免疫紊乱的危险因素。3.甲状腺自身抗体阳性是1A、1B型糖尿病和LADA患者将来发生甲状腺功能异常的危险因素。第二部分GAD65抗原表位反应性对1型糖尿病伴甲状腺自身免疫的预测探讨目的：探讨伴甲状腺自身免疫的1型糖尿病(T1DM)及LADA患者GAD65抗原表位反应性的差异。设计：横断面、病例-对照研究。方法：采用放射配体法对112例T1DM患者,107例LADA患者及100例正常对照进行GADA对GAD67、GAD65氨基端(GAD65-N)、GAD65中段(GAD65-M)、GAD65羧基端(GAD65-C)抗原表位反应性研究,采用放射免疫法检测甲状腺自身抗体。结果：1.T1DM患者GADA对GAD67、GAD65-N端、GAD65-M段及GAD65-C端的识别率分别为4.5%、11.6%、31.2%、68.8%；LADA患者GADA对GAD67、GAD65-N端、GAD65-M段及GAD65-C端的识别率分别为11.2%、22.4%、31.8%、47.7%,均显著高于正常对照(P<0.05)。2.T1DM患者GADA与GAD65-C端结合率高于LADA患者(68.8%vs47.7%,P=0.002)。LADA患者GADA与GAD65-N端结合率高于T1DM患者(22.4%vs11.6%,P<0.05)。3.与甲状腺自身抗体阴性的T1DM和LADA患者相比,甲状腺自身抗体阳性的T1DM和LADA患者GADA同时与GAD65-M段和GAD65-C端抗原表位的结合率均显著增高(46.0%vs14.5%和51.6%vs18.4%P均<0.001)。4.同时识别GAD65-M段及-C端的LADA患者高滴度GADA (GADA≥0.3)所占比例高、甲状腺自身抗体阳性率高、更多依赖胰岛素治疗、空腹及餐后C肽水平较低(P均<0.05)。5. Logistic回归分析显示GADA同时识别GAD65-M及-C端抗原是T1DM及LADA患者发生甲状腺功能自身免疫紊乱的危险因素(OR=5.016和4.724)。结论：1. T1DM和LADA患者主要识别GAD65-M及-C端的构象型表位。T1DM患者GADA与GAD65-C端抗原表位结合能力较LADA强,而LADA患者GADA与GAD65-N端抗原表位的结合能力较T1DM强,两者存在抗原识别表位的差异。2.同时识别GAD65-M及-C端抗原表位的LADA患者临床表现更倾向于T1DM。3. GADA同时识别GAD65-M及-C端抗原表位是T1DM及LADA患者发生甲状腺自身免疫紊乱的危险因素。通过在T1DM及LADA患者中进行GAD65-M及-C端抗原表位反应性的检测有助于预测甲状腺自身免疫紊乱发生的风险。第三部分CTLA-4和HLA-DQ基因多态性对1型糖尿病伴甲状腺自身免疫的预测作用目的：探讨CTLA-4+49A/G、CT60及HLA-DQ基因多态性对TIDM和LADA伴甲状腺自身免疫的预测价值。设计：横断面、病例-对照研究。方法：对402例T1DM、231例LADA患者、476例正常对照进行CTLA-4+49A/G、CT60基因及HLA-DQ基因的分型。TIDM及LADA患者还检测甲状腺自身抗体。CTLA-4 CT60及+49A/G基因检测采用限制性片段长度多态性分析法,HLA-DQ基因分型采用PCR-直接测序法,采用放射免疫法检测TPO-Ab、TG-Ab,放射配体法检测GADA。结果：1.T1DM患者CTLA-4 CT60基因型GG和等位基因G频率高于正常对照(65.2%vs56.7%和81.5%vs75.9%,P均<0.05)。合并甲状腺自身免疫的T1DMGG基因型频率及等位基因G频率更高(76.6%vs56.7%和87.9%vs75.9%,P均<0.05)。2.TIDM患者CTLA-4+49A/G基因型GG及等位基因G频率均高于正常对照(45.3%vs35.1%和69.4%vs60.2%,P均<0.05)。合并甲状腺自身免疫的T1DM CTLA-4+49A/G GG基因型及等位基因G频率更高(57.0%vs35.1%和77.1%vs60.2%,P均<0.05)。3. LADA患者CTLA-4+49A/G基因型GG及等位基因G频率高于正常对照(44.2%vs35.1%和68.8%vs60.2%,P均<0.05)。LADA患者CTLA-4 CT60基因型及等位基因频率与正常对照无显著性差异。4.与甲状腺自身抗体阴性者相比,甲状腺自身抗体阳性T1DM患者CTLA-4+49A/G及CTLA-4 CT60 GG基因型频率均较高(57.0%vs38.8%和76.6%vs58.3%,P<0.05),易携带HLA-DQA 1*03-DQB 1*0401易感单倍型(11.3%vs6.3%,P=0.042)。5.甲状腺自身抗体阳性与阴性的LADA患者相比,更易携带HLADQA1*05-DQB 1*0201及DQA1*03-DQB 1*0401单倍型(14.6%vs3.0%和14.6%vs5.2%,P均<0.05),而CTLA-4 CT60、+49A/G基因型及等位基因分布频率在两者间均无显著性差异。结论：1.CTLA-4+49A/G和CT60基因多态性与T1DM相关,尤其是合并甲状腺自身免疫的T1DM.2.HLA-DQA1*03-DQB1*0401单倍型与T1DM合并甲状腺自身免疫有关。3.HLA-DQA1*05-DQB1*0201及DQA1*03-DQB1*0401单倍型与LADA合并甲状腺自身免疫相关。