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真核生物进化的应激反应对维持细胞稳态和应对外界刺激是有利的,找到应激反应的调控机制对预防、减轻甚至治愈严重应激反应相关疾病具有重要意义。在生物体整个生命过程中,转录因子Nrf1是维持细胞稳态及生长发育的重要参与者,转录因子Nrf2在调控细胞内环境氧化还原稳态方面也具有极其重要的作用,其功能涉及到细胞生命活动各个方面,二者在结构上很相似,功能上也有一部分重叠。Nrf1的亚型Nrf1D结构虽与Nrf1相似,但其独特的C端末端朝向内质网腔内侧的跨膜区,使其比Nrf1在内质网膜上结合更紧密。为了了解Nrf1、Nrf2与应激反应的关系及Nrf1D的生化特性,本文初步探讨了用DTT诱导细胞,模拟细胞氧化应激和内质网应激环境,利用qPCR技术和Western Blot技术检测Nrf1及Nrf2对细胞氧化应激基因和内质网应激基因的差异作用,并对Nrf1D是否因其独特的结构而存在功能差异进行了挖掘。得到以下结论:(1)DTT刺激下可使细胞内Nrf1及Nrf2表达上调,且Nrf1转录水平和翻译水平变化可能是DTT刺激及其引起的应激反应共同作用的结果;(2)Nrf1与Nrf2差异性调控氧化应激和内质网应激相关基因表达水平,其中Nrf1在维持细胞稳态的基因调控作用中更为显著,而Nrf2更偏重于对应激反应基因的调控;(3)Nrf1D亚型存在于小鼠多个组织包括血浆中。Nrf1D在核内的85kDa活性蛋白较少,大部分存在于胞质内;(4)Nrf1D相较于Nrf1更为稳定,其受到独特的TMc相关膜的部分保护,抵御细胞内蛋白酶体的降解,且其TMc区域对Nrf1D有加工修饰作用。综上所述,Nrf1及Nrf2在调控氧化应激和内质网应激基因方面具有一定的协同作用。Nrf1D广泛存在于小鼠多个组织,且大量存在于血浆中,因此推测它经过潜在的分泌通路到达血浆。但是,本研究只是初步解析Nrf1D结构特性,为进一步探索其独特功能提供了一个有意义的基础。