3D打印马鹿角粉/SF/PVA支架的体内成骨实验研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kitwe
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目的:探讨骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/SF/PVA骨支架修复羊下颌骨缺损的能力及成骨效果。方法:全骨髓法培养羊BMSCs、细胞膜片技术及3D FDM技术构建BMSCs细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/SF/PVA组织工程骨支架。选取12只新疆阿勒泰大尾羊,均分为1、2、3月末组、每组4只,于双侧下颌骨区制备20 mm×3 mm×5 mm的实验骨缺损区。每组2只羊一侧植入细胞膜片复合3D打印鹿角粉/SF/PVA支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵对照,每组另外2只羊,一侧植入细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵对照。植入1、2、3月末处死实验动物,下颌骨取材进行大体、CBCT、HE观察及RT-PCR检测成骨相关指标。结果:(1)原代羊BMSCs,可见梭形等形态的细胞散在贴壁,第2代BMSCs表面标志物CD44表达呈阳性,第3代BMSCs成功诱导成膜并构建组织工程骨。(2)CBCT:第1、2月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA植入骨缺损区呈稀薄云雾状,支架吸收较多、细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架吸收相对较少;第3月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA有大量的新骨形成,密度接近周围骨质,但细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架骨缺损区未长满,骨密度较低。对照组3月变化均不明显。(3)HE:第3个月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架与其他两组相比,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架材料吸收较多,可见骨小梁排列规则及成熟板状骨,细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架也有少量新骨形成,细胞膜片复合明胶海绵3个月末变化均不明显;(4)RT-PCR:细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架的OPN、OCN、COL-1的m RNA表达水平均高于细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架及对照组,在第3月末时成骨基因的表达量达到最高,同时,在1、2、3月末,同一时间细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架的OPN、OCN、COL-1的m RNA水平表达量均显著高于细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架及对照组(P<0.05)。结论:3D打印马鹿角粉/SF/PVA骨支架能够引导颌骨极限缺损区形成新骨,可满足羊颌骨实验性骨缺损的修复重建,可能成为一种新的修复骨缺损的异种骨材料。
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