【摘 要】
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异柠檬酸裂解酶(Isocitrate Lyase,ICL)是乙醛酸循环的关键限速酶,它催化异柠檬酸产生琥珀酸和乙醛酸.最新的研究表明:处于持留状态的结核杆菌通过乙醛酸循环途径获取能量,维
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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异柠檬酸裂解酶(Isocitrate Lyase,ICL)是乙醛酸循环的关键限速酶,它催化异柠檬酸产生琥珀酸和乙醛酸.最新的研究表明:处于持留状态的结核杆菌通过乙醛酸循环途径获取能量,维持其在宿主体内的长期存在,异柠檬酸裂解酶对结核杆菌的持留性起着决定性作用.我们以结核杆菌H<,37>Rv基因组为模板,通过分子生物学方法,克隆、表达编码异柠檬酸裂解酶的基因Rv0467,构建了高效表达结核杆菌H37Rv异柠檬酸裂解酶的基因工程菌;通过金属螯合层析方法对工程菌的表达产物进行纯化,获得纯度在90%以上异柠檬酸裂解酶,建立了异柠檬酸裂解酶活性的测定方法;并在此基础上建立了以异柠檬酸裂解酶为靶点、抗持留性结核杆菌的新型抗结核药物筛选模型.应用该模型对2000个微生物发酵液进行了筛选,得到82个初筛阳性菌株,初筛阳性率为4.1%.对82阳性菌株复筛后,得到5个活性稳定的阳性菌株,复筛阳性率为6.1%.对其中活性较强的阳性菌株No.8081进行了初步的化学研究,结果表明:发酵液中既含有是脂溶性的活性成分,也含有水溶性的活性成分.
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