论文部分内容阅读
血脂代谢异常是导致动脉粥样硬化和冠心病的重要因素之一。食用鹰嘴豆能有效降低血液中血脂水平,减少胆固醇堆积。其辅助降血脂的营养成分主要集中在鹰嘴豆异黄酮(主要是鹰嘴豆芽素A)和鹰嘴豆蛋白/肽上。本论文通过体外化学模拟体系、细胞培养、模型鼠体内实验结合分子动力学理论系统研究鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆肽CPe-Ⅲ的调节脂代谢生物活性及构效关系,为深入研究天然活性肽、异黄酮协同调节脂代谢作用提供理论基础和科学依据。利用超声波辅助法提取鹰嘴豆芽素A,经大孔树脂AB-8分离纯化。通过检测总还原能力、DPPH·、ABTS·+清除能力评价其抗氧化作用,结果显示鹰嘴豆芽素A有很强的总还原能力和自由基清除能力,并呈现剂量效应关系。细胞培养实验结果表明鹰嘴豆芽素A具有抑制肿瘤细胞增殖的能力。且能促进RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出,减少胆固醇积累,抑制泡沫细胞形成。构建高脂血症模型小鼠,以辛伐他汀为阳性对照,通过测定小鼠的体重,粪脂,血脂中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的变化,小鼠肝、心、脾、肾及附睾脂肪的脏器指数以及肝脂酶的活性,观察肝的HE染色切片,系统研究鹰嘴豆芽素A和肽CPe-Ⅲ调节脂代谢作用。结果表明,与高脂膳食组相比,各处理组总甘油三酯和总胆固醇水平降低,高密度脂蛋白含量增加,SOD、LPL、HL等相关酶活性和粪脂均增加,肝脏病变亦相应得以改善。提示鹰嘴豆芽素A和肽CPe-Ⅲ能够有效改善高脂血症小鼠的血脂代谢异常。在分析鹰嘴豆芽素A和肽CPe-Ⅲ与CETP靶点结合位点基础上,采用Autodock、ZDOCK和FiberDock软件进行分子对接,并利用分子动力学Amber模拟解析其相互作用规律。结果显示鹰嘴豆芽素A与受体CETP作用的活性区域主要分布在两个疏水区域,可以有效地结合配体的侧链或基团而相互作用;CPe-Ⅲ在CETP的空腔内狭窄处结合,通过阻碍脂质的逆转运,增加HDL水平,从而促进血脂代谢。