酵母cAMP信号转导及时序衰老机制研究

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酿酒酵母的cAMP信号通路,即Ras/cAMP/PKA信号转导通路在调控酵母细胞代谢、增殖、分化及压力抗性的获得过程中具有及其重要的作用,因此,在过去二十年里,这条信号通路引起了极大的关注和广泛深入的研究。目前该信号通路的许多组成成分已经被发现,所传导的信号的性质及功能也被人们所初步认识,但是许多科学问题仍然有待于我们去探索。本论文的主要研究内容是:Pde1和Pde2两个磷酸二酯酶对细胞内cAMP水平的调节作用;Ras1和Ras2对酵母细胞内cAMP合成的影响;氮源和Sch9蛋白激酶对Ras-cAMP信号通路的调控作用;酵母细胞时序寿命与Ras-cAMP信号通路的活性及细胞热激抗性的关系。我们的研究结果证明在PKA活性组成型减弱菌株JT123中,Pde1对cAMP信号通路的影响不大,Pde2较Pde1具有显著的影响作用。另外我们发现,Pde1除了参与PKA对葡萄糖诱导的cAMP信号的反馈抑制作用外,还对细胞内的基础cAMP水平起重要的调节作用,这种作用主要发生在细胞生长的稳定期。不同的RAS基因(RAS1和RAS2)缺失,对Ras-cAMP信号通路产生不同的影响,Ras2较Ras1对该信号通路具有更大的影响作用。不同RAS基因所表现出来的对于Ras-cAMP信号通路的不同活性主要是由于两个RAS基因的启动子强弱的不同,而不是两个基因所编码的蛋白的特性的不同。氮源对酵母细胞感知环境中的葡萄糖,即葡萄糖激活cAMP信号通路起非常重要的作用。在氮源存在条件下Sch9蛋白激酶对Ras-cAMP信号通路起正调控作用,在氮源缺乏条件下,Sch9蛋白激酶对Ras-cAMP信号通路起负调控作用。显然Sch9把环境中葡萄糖的存在与细胞生长的其它必要营养成分,如氮源的存在这些环境信息整合起来,以协调细胞的生命活动。以葡萄糖为碳源的培养基中培养的酵母细胞,其时序寿命与Ras-cAMP信号通路的活性负相关,而与细胞的热激抗性正相关;但是,以甘油为碳源的培养基中培养的酵母细胞,细胞的时序寿命与Ras-cAMP信号通路的活性正相关,而与细胞的热激抗性负相关。这说明在上述两种不同的生长条件下,Ras-cAMP信号通路以不同的机制调控细胞的时序寿命。
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