柴黄清胰活血方对重症急性胰腺炎模型大鼠肝损伤的保护作用及机制研究

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目的:通过观察柴黄清胰活血方对重症急性胰腺炎模型大鼠血清淀粉酶(AMY)、血清脂肪酶(LPS)、血白细胞(WBC)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、胰腺及肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、核转录因子-κB(NF-κB)及血红素加氧酶-1(HO-1)的影响,探讨柴黄清胰活血方对重症急性胰腺模型大鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:128只SPF级雄性SD大鼠,体重在220g-280g之间,随机分为4组:空白组(Blank)(n=32)、假手术组(Sham)(n=32)、模型组(SAP)(n=32)、柴黄清胰活血方组(柴黄组/chaihuangzu)(n=32)。实验前,大鼠禁饮禁食12h,采用胆胰管逆行注射溶于生理盐水的5%(g/ml)牛磺胆酸钠溶液(0.1ml/100g)制作重症急性胰腺大鼠模型,假手术组和模型组灌胃生理盐水,柴黄组灌胃溶于生理盐水的柴黄清胰活血方流浸膏(1.2g/kg),每6h一次,分别于6h、12h、24h、48h分批麻醉大鼠后采集血液及胰腺和肝脏组织;各组大鼠胰腺及肝脏组织形态学观察及HE染色;生化法检测血清AMY、LPS、ALT、AST、血WBC及胰腺和肝脏新鲜组织SOD、GSH-Px、CAT、MDA;ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、IL-18;Western Blot检测胰腺及肝脏组织NF-κB、p-NF-κB、HO-1的表达;免疫组化染色检测肝组织NF-κB的表达;荧光定量PCR检测新鲜肝脏组织HO-1m RNA、NF-κB m RNA的表达。结果:1.与空白组相比,假手术组胰腺及肝脏组织肉眼和光镜下观察无明显改变;血清AMY、LPS、ALT、AST、IL-1β、IL-6、IL-18及血WBC水平未见明显差异;胰腺及肝脏组织SOD、GSH-Px、MDA、CAT、NF-κB、p-NF-κB、HO-1表达水平无明显差异;肝脏组织HO-1m RNA、NF-κB m RNA表达水平无明显差异。差异无统计学意义。2.与假手术组相比,柴黄组和模型组胰腺及肝脏组织肉眼和光镜下观察有明显病理改变;血清AMY、LPS、ALT、AST、IL-1β、IL-6、IL-18及血WBC水平明显升高(p<0.05);胰腺及肝脏组织SOD、GSH-Px、CAT水平降低(p<0.05),MDA水平升高(p<0.05),NF-κB、p-NF-κB、HO-1表达水平升高((p<0.05);肝脏组织HO-1m RNA、NF-κB m RNA表达水平升高(p<0.05)。差异有统计学意义。3.与模型组相比,柴黄组胰腺及肝脏组织损伤明显改善;血清AMY、LPS、ALT、AST、IL-1β、IL-6、IL-18及血WBC水平降低(p<0.05);胰腺及肝脏组织SOD、GSH-Px、CAT水平升高(p<0.05),MDA水平降低(p<0.05),NF-κB、p-NF-κB表达水平降低(p<0.05),HO-1表达水平升高(p<0.05);肝脏组织NF-κB m RNA表达水平降低(p<0.05),HO-1m RNA表达水平升高(p<0.05)。差异有统计学意义。结论:1.柴黄清胰活血方对SAP模型大鼠肝损伤有保护作用;2.柴黄清胰活血方可通过降低IL-1β、IL-6、IL-18、MDA水平,升高SOD、GSH-Px、CAT水平,下调NF-κB的表达和上调HO-1的表达对SAP模型大鼠肝损伤起到保护作用。
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