目的:建立丙氨酸氨基转移酶的参考方法,并对建立的参考方法进行方法学评价,探讨参考方法在临床中的应用。方法:依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)公布的参考测量程序建立ALT参考方法,并改进实验条件,建立我室的ALT参考方法;按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件(EP15-A、EP5-A2、EP6-A)分别对建立的参考方法的准确度、精密度、线性范围进行方法学评价。用建立的参考方法与Beckman DxC800临床常规检测系统进行比对研究,判断其临床可接受性。结果:1.岛津紫外分光光度计、pH计、移液管、容量瓶、岛津分析天平、点温度计均被山西省质量监督局检定合格。对反应条件的优化:(1)移液枪吸样模式为吸一档打两档准确度最好;移液器各量程准确度达到要求。(2)反应温度稳定在37℃时,温度控制器显示为36.9℃;(3)在孵育360s的情况下,比色杯杯内温度已经上升到37℃;(4)分光光度计340nm吸光度的准确度检测、杂散光、吸光度的线性、比色杯的携带污染率在要求范围内。2.对反应条件进行优化后,对改进的ALT参考方法进行方法学评价,低值、高值批内精密度均<1%,总精密度均<2%;与罗氏c.f.a.s多项校准液靶值比较,在不确定度要求范围内;ALT线性范围的上限为330.4U/L。3.用参考方法来评价临床常规检测系统(Beckman DxC800),相关性良好(r~2=0.9998),两者在医学决定水平处的相对偏倚均<1/2CLIA’88。结论:ALT参考方法已基本建立,准确度、精密度、线性范围性能指标均符合方法学要求。Beckman DxC 800全自动生化分析仪与参考方法具有可比性,检测结果可以用于临床。