研究目的 研究肿瘤相关基因蛋白FHIT、PTEN、Rb、p27、p53、mdm2、C-erbB-2、bcl-2、bax和nm23在肺神经内分泌癌的表达与肿瘤生物学特点及病人生存时间的关系，寻找新的与神经内分泌癌预后相关的分子标记物，以期为临床提供更多的信息，指导治疗，提高五年生存率。 研究方法 本实验为回顾性研究：复习解放军总医院病理科1988～2001年间手术切除的肺神经内分泌癌切片，根据1999年WHO修正的肺癌分类法，选出肺神经内分泌癌各型病例。查阅相关病历，并随访病人治疗及预后情况，得到完整临床资料。 免疫组化染色：采用SP法，微波炉抗原修复，以DAB显色，以正常组织为对照。 细胞培养及总RNA的提取：培养NCI-H446细胞系，该细胞系源于一小细胞肺癌患者。另取新鲜手术标本正常肺组织，立即冻存于液氮中。总RNA提取采用Trizol reagent。 解放军总医院军医进修学院 肺神经内分泌癌预后因素的研究 总 RNA反转录与芯片杂交：肿瘤组织 CDNA标以 Cys，正常 组织 cDNA标以 Cy3。芯片为寡核警酸微点阵，杂交后清洗，双色 激光扫描，处理数据。并与免疫组化染色结果对照检验。 结果 59例肺神经内分泌癌病人平均57岁，小细胞癌、大细胞神经 内分泌癌和不典型类癌男性明显多于女性，典型类癌男女差别不明 显。 各基因蛋白勺阳性率分别为 FHIT 660，PTEN 34y，Rb 290， p27 66％，p53 25％，mdmZ 14％，C－erbB－2 14％，bax 56％，bclZ 46％，＂m23 90y。其中与分类有关的是 FHIT、PTEN、Rb、 bax；与临床分期有关的是PTEN、Rb、bax，三者均为分期越高， 表达越低；与淋巴结转移有关的是PTEN、Rb、、bax、ntn23和p53、 mdmZ，前四项其表达与转移负相关，后两项表达与转移正相关， 即阳性组易于发生淋巴结转移。 单因素生存分析与预后有关的是FHIT、PT枷、Rb、p27、nln23 和p53、mdmZ、hcf－2。其中p53、mdmZ、hcf－2阳性者预后较差， 生存期较短，而FHIT、PTEN、拙、p37、＂m23阳性者预后较好， 生存期较长。Cox多因素生存分析发现，FHIT、Rb、p27、mdmZ、 bCI上是独立的影响肺神经内分泌癌的预后因素。 芯片杂文结果显示 FHIT mRNA、Rb mRNA和野生型 p53 InRNA在小细胞癌细胞系的表达明显下调，其它基因显示与蛋白质 改变相一致的变化趋势，但改变不明显。 结论 1．肿瘤抑制基因的蛋白FHIT、Rb、p27和原癌基因蛋白mdmZ、 bC12是肺神经内分泌癌独立的预后因子。FHIT、Rb、p27的表达， 提示病人预后较好；生存期较长，蛋白质的缺失预示病人的预后较 3 解放军总医院军医进修学院 肺神经内分泌俊颀后因素的研究 差，生存期较短。而mdmZ、hcf毛的表达则提示病人预后较差，生 存期较短，无表达提示预后较好。 2．基因蛋白PTEN、p53、＂m23在单因素生存分析时与预后相关， 而在多因素生存分析中被排除。提示基因是通过其它因素影响生存 期。 3．C七山B上在肺神经内分泌癌中阳性率很低，其中＊。细胞癌不表 达。