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头皮屑(Dandruff)是一种常见且易复发的头皮健康问题，表现为头皮及头发里出现大量薄片状的皮屑。有研究表明，限制性马拉色菌为头皮部位马拉色菌中主要的优势菌种，并且马拉色菌群落在物种水平上的丰富多样性与头皮屑无直接关系。因此，有效控制头皮部位限制性马拉色菌的数量，维持头皮微生态的平衡，是预防和治疗头皮屑的有效途径。
目前，临床上用于治疗头皮屑的药物酮康唑，因其具有良好的抗真菌活性，可有效快速的减少头部真菌，从而产生治疗效果；但其具有一定的刺激性，长期接触皮肤，可产生皮疹、瘙痒、色素沉着等不良反应，并且长期使用，容易产生耐药性；吡啶硫酮锌(ZPT)，因其良好的杀菌活性，且会停留在毛囊及皮脂腺部位，可发挥持久的抗菌效果，使其成为日化领域使用最为广泛的去屑剂；但吡啶硫酮锌存在一定的毒性和刺激性，其具有强烈的脱脂效果，长期使用会使头发干枯、断裂及头皮干燥等问题，已经不能满足广大消费者追求健康、绿色的愿望。
中药在日化领域及临床应用中有广泛的使用，不仅具有较好的治疗效果，且不良反应少。因此从中药中寻找绿色、有效、安全的抗限制性马拉色菌中药提取物及活性成分，应用于预防或者治疗与马拉色菌感染相关的头皮问题，已成为现今日化领域发展的重大趋势。
本课题的研究目的：
1.基于中医药临床、文献报道以及经典名方的用药经验，从中选取三十种中药及二十五种中药化学成分，进行抗限制性马拉色菌体外活性筛选。
2.对筛选出活性较好的中药提取物和化学成分，研究其对限制性马拉色菌所致感染模型豚鼠的皮肤组织及皮肤组织中增殖因子的影响；考察其对磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型的作用；进一步探讨其对鸡胚绒毛膜尿囊膜的眼刺激性。
3.为中药在预防和治疗马拉色菌感染相关皮肤疾病的进一步研究及在去屑止痒产品中的应用，提供有价值的理论参考依据。
主要研究内容如下：
1.中药提取物的抗菌活性筛选；从经典方、文献报道及临床经验中选取30种中药，采用试管液基倍比稀释法测定其水提物和醇提物(共60个样品)抗限制性马拉色菌的最低抑菌浓度，从中筛选出具有较好抗菌活性的中药提取物。
2.中药化学成分的抗菌活性筛选；基于文献报道，筛选出25种中药化学成分，参照CLSI制定的M27-A3方案中的微量稀释法，测定其抗限制性马拉色菌的最低抑菌浓度，筛选出具有较好抗菌活性的中药化学成分。
3.诃子水提物及柠檬醛抗限制性马拉色菌体内药理活性实验；根据前期筛选结果，选取诃子水提物和柠檬醛进行后续的动物实验研究，通过建立限制性马拉色菌所致豚鼠感染模型的方法，考察样品对豚鼠皮损评分、真菌学转阴率、皮损组织显微病理结构以及细胞增殖因子Ki67的影响；探讨其抗限制性马拉色菌的动物体内药理活性。
4.诃子水提物及柠檬醛的止痒活性实验；采用磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型，考察诃子水提物及柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型的致痒域的影响；探讨其止痒活性。
5.诃子水提物及柠檬醛的眼刺激性实验；采用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验，考察诃子水提物及柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜血管的影响；依据眼刺激性评分，探讨其是否具有眼刺激性。
研究结果如下：
1.中药提取物抗菌活性筛选实验；通过60个中药提取物对限制性马拉色菌最低抑菌浓度的测定，在30个中药水提取物中，抗菌活性由强至弱，前三个分别为诃子(7.206±2.30)mg/mL、苍术(13.365±4.30)mg/mL、五倍子(18.021±8.87)mg/mL；30个中药95%乙醇提取物中，抗菌活性由强至弱，前三个分别为诃子(33.544±5.26)mg/mL、虎杖(42.468±7.06)mg/mL、蒲公英(53.734±15.51)mg/mL。
2.中药化学成分抗菌活性筛选实验；通过25个中药化学成分对限制性马拉色菌最低抑菌浓度的测定，在中药化学成分中，抗菌活性由强至弱，前五个分别为柠檬醛(0.138±0.076μg/mL)、丁香酚(0.330±0.116μg/mL)、芳樟醇(0.694±0.194μg/mL)、肉桂醛(1.810±1.042μg/mL)、乙酸芳樟酯(3.75±1.875μg/mL)。
3.诃子水提物对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染模型的影响实验；与模型组相比，诃子水提物中、高剂量组的豚鼠模型皮损评分明显降低(P＜0.05)；真菌学转阴率提高；通过对豚鼠皮肤切片的观察，与模型组相比，豚鼠皮肤的表皮层厚度变薄，真皮与表皮结合处弯曲度降低，网脊线大幅度缩短；通过对豚鼠皮肤的Ki67免疫组化染色切片观察，与模型组相比，诃子水提物各剂量组豚鼠皮肤组织中Ki67表达没有明显变化。
4.柠檬醛对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染模型的影响实验；与模型组相比，柠檬醛高剂量组，豚鼠模型皮损评分可明显降低(P＜0.05)；真菌学转阴率明显提高；通过对豚鼠皮肤切片的观察，与模型组相比，柠檬醛中、高剂量组豚鼠皮肤的表皮层厚度变薄，真皮与表皮结合处弯曲度降低，网脊线缩短；通过对豚鼠皮肤的Ki67免疫组化染色切片观察，与模型组相比，柠檬醛中、高剂量组豚鼠皮肤组织中Ki67表达明显降低。
5.诃子水提物及柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒模型的影响实验；与模型组相比，诃子水提物低、中、高剂量组，可明显提高豚鼠瘙痒模型的致痒域(P＜0.05)；与模型组相比，柠檬醛中剂量组，可明显提高豚鼠瘙痒模型的致痒域(P＜0.05)。
6.诃子水提物及柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜的影响实验；诃子水提物低、中、高剂量组的鸡胚刺激性反应评分为2、4、5，均处于无刺激性范围；柠檬醛低、中、高剂量组的鸡胚刺激性反应评分为1、3、4，均处于无刺激性范围，对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性。
结论如下：
1.通过对30个中药水提取物和30个中药95%乙醇提取物进行抗限制性马拉色菌活性测定，筛选出具有较好抗菌活性的中药提取物，其中，诃子水提物有作为限制性马拉色菌抑制剂开发的潜力。
2.在25个中药化学成分中，柠檬醛、丁香酚显示出较好的抗限制性马拉色菌活性，具有应用于预防或治疗马拉色菌感染皮肤问题的潜力。
3.诃子水提物能够有效改善限制性马拉色菌引起的皮肤感染症状；对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒具有较好的止痒作用；对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性；具有取代或部分取代化学药物去屑止痒剂在日化领域中应用的潜在价值。
4.柠檬醛对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染有较好的治疗作用；柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒具有较好的止痒作用；柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性；具有应用于去屑止痒类日化产品的潜力，可为中药在预防和治疗头皮屑药物的进一步研究提供理论基础。
综上所述，通过对60个中药提取物(其中，30个中药水提取物与30个95%乙醇提取物)抑制限制性马拉色菌活性的筛选，发现诃子水提物及柠檬醛具有较好抗菌活性，对其抗限制性马拉色菌动物体内药理活性、止痒活性及眼刺激性进行了研究，为诃子水提物及柠檬醛在日化领域的应用奠定了理论基础，也为中药在预防和治疗头皮屑药物的进一步研究及在去屑止痒类日化产品中的应用提供有价值的理论参考依据。
目前，临床上用于治疗头皮屑的药物酮康唑，因其具有良好的抗真菌活性，可有效快速的减少头部真菌，从而产生治疗效果；但其具有一定的刺激性，长期接触皮肤，可产生皮疹、瘙痒、色素沉着等不良反应，并且长期使用，容易产生耐药性；吡啶硫酮锌(ZPT)，因其良好的杀菌活性，且会停留在毛囊及皮脂腺部位，可发挥持久的抗菌效果，使其成为日化领域使用最为广泛的去屑剂；但吡啶硫酮锌存在一定的毒性和刺激性，其具有强烈的脱脂效果，长期使用会使头发干枯、断裂及头皮干燥等问题，已经不能满足广大消费者追求健康、绿色的愿望。
中药在日化领域及临床应用中有广泛的使用，不仅具有较好的治疗效果，且不良反应少。因此从中药中寻找绿色、有效、安全的抗限制性马拉色菌中药提取物及活性成分，应用于预防或者治疗与马拉色菌感染相关的头皮问题，已成为现今日化领域发展的重大趋势。
本课题的研究目的：
1.基于中医药临床、文献报道以及经典名方的用药经验，从中选取三十种中药及二十五种中药化学成分，进行抗限制性马拉色菌体外活性筛选。
2.对筛选出活性较好的中药提取物和化学成分，研究其对限制性马拉色菌所致感染模型豚鼠的皮肤组织及皮肤组织中增殖因子的影响；考察其对磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型的作用；进一步探讨其对鸡胚绒毛膜尿囊膜的眼刺激性。
3.为中药在预防和治疗马拉色菌感染相关皮肤疾病的进一步研究及在去屑止痒产品中的应用，提供有价值的理论参考依据。
主要研究内容如下：
1.中药提取物的抗菌活性筛选；从经典方、文献报道及临床经验中选取30种中药，采用试管液基倍比稀释法测定其水提物和醇提物(共60个样品)抗限制性马拉色菌的最低抑菌浓度，从中筛选出具有较好抗菌活性的中药提取物。
2.中药化学成分的抗菌活性筛选；基于文献报道，筛选出25种中药化学成分，参照CLSI制定的M27-A3方案中的微量稀释法，测定其抗限制性马拉色菌的最低抑菌浓度，筛选出具有较好抗菌活性的中药化学成分。
3.诃子水提物及柠檬醛抗限制性马拉色菌体内药理活性实验；根据前期筛选结果，选取诃子水提物和柠檬醛进行后续的动物实验研究，通过建立限制性马拉色菌所致豚鼠感染模型的方法，考察样品对豚鼠皮损评分、真菌学转阴率、皮损组织显微病理结构以及细胞增殖因子Ki67的影响；探讨其抗限制性马拉色菌的动物体内药理活性。
4.诃子水提物及柠檬醛的止痒活性实验；采用磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型，考察诃子水提物及柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠瘙痒模型的致痒域的影响；探讨其止痒活性。
5.诃子水提物及柠檬醛的眼刺激性实验；采用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验，考察诃子水提物及柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜血管的影响；依据眼刺激性评分，探讨其是否具有眼刺激性。
研究结果如下：
1.中药提取物抗菌活性筛选实验；通过60个中药提取物对限制性马拉色菌最低抑菌浓度的测定，在30个中药水提取物中，抗菌活性由强至弱，前三个分别为诃子(7.206±2.30)mg/mL、苍术(13.365±4.30)mg/mL、五倍子(18.021±8.87)mg/mL；30个中药95%乙醇提取物中，抗菌活性由强至弱，前三个分别为诃子(33.544±5.26)mg/mL、虎杖(42.468±7.06)mg/mL、蒲公英(53.734±15.51)mg/mL。
2.中药化学成分抗菌活性筛选实验；通过25个中药化学成分对限制性马拉色菌最低抑菌浓度的测定，在中药化学成分中，抗菌活性由强至弱，前五个分别为柠檬醛(0.138±0.076μg/mL)、丁香酚(0.330±0.116μg/mL)、芳樟醇(0.694±0.194μg/mL)、肉桂醛(1.810±1.042μg/mL)、乙酸芳樟酯(3.75±1.875μg/mL)。
3.诃子水提物对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染模型的影响实验；与模型组相比，诃子水提物中、高剂量组的豚鼠模型皮损评分明显降低(P＜0.05)；真菌学转阴率提高；通过对豚鼠皮肤切片的观察，与模型组相比，豚鼠皮肤的表皮层厚度变薄，真皮与表皮结合处弯曲度降低，网脊线大幅度缩短；通过对豚鼠皮肤的Ki67免疫组化染色切片观察，与模型组相比，诃子水提物各剂量组豚鼠皮肤组织中Ki67表达没有明显变化。
4.柠檬醛对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染模型的影响实验；与模型组相比，柠檬醛高剂量组，豚鼠模型皮损评分可明显降低(P＜0.05)；真菌学转阴率明显提高；通过对豚鼠皮肤切片的观察，与模型组相比，柠檬醛中、高剂量组豚鼠皮肤的表皮层厚度变薄，真皮与表皮结合处弯曲度降低，网脊线缩短；通过对豚鼠皮肤的Ki67免疫组化染色切片观察，与模型组相比，柠檬醛中、高剂量组豚鼠皮肤组织中Ki67表达明显降低。
5.诃子水提物及柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒模型的影响实验；与模型组相比，诃子水提物低、中、高剂量组，可明显提高豚鼠瘙痒模型的致痒域(P＜0.05)；与模型组相比，柠檬醛中剂量组，可明显提高豚鼠瘙痒模型的致痒域(P＜0.05)。
6.诃子水提物及柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜的影响实验；诃子水提物低、中、高剂量组的鸡胚刺激性反应评分为2、4、5，均处于无刺激性范围；柠檬醛低、中、高剂量组的鸡胚刺激性反应评分为1、3、4，均处于无刺激性范围，对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性。
结论如下：
1.通过对30个中药水提取物和30个中药95%乙醇提取物进行抗限制性马拉色菌活性测定，筛选出具有较好抗菌活性的中药提取物，其中，诃子水提物有作为限制性马拉色菌抑制剂开发的潜力。
2.在25个中药化学成分中，柠檬醛、丁香酚显示出较好的抗限制性马拉色菌活性，具有应用于预防或治疗马拉色菌感染皮肤问题的潜力。
3.诃子水提物能够有效改善限制性马拉色菌引起的皮肤感染症状；对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒具有较好的止痒作用；对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性；具有取代或部分取代化学药物去屑止痒剂在日化领域中应用的潜在价值。
4.柠檬醛对限制性马拉色菌所致豚鼠皮肤感染有较好的治疗作用；柠檬醛对磷酸组胺所致豚鼠皮肤瘙痒具有较好的止痒作用；柠檬醛对鸡胚绒毛膜尿囊膜无刺激性；具有应用于去屑止痒类日化产品的潜力，可为中药在预防和治疗头皮屑药物的进一步研究提供理论基础。
综上所述，通过对60个中药提取物(其中，30个中药水提取物与30个95%乙醇提取物)抑制限制性马拉色菌活性的筛选，发现诃子水提物及柠檬醛具有较好抗菌活性，对其抗限制性马拉色菌动物体内药理活性、止痒活性及眼刺激性进行了研究，为诃子水提物及柠檬醛在日化领域的应用奠定了理论基础，也为中药在预防和治疗头皮屑药物的进一步研究及在去屑止痒类日化产品中的应用提供有价值的理论参考依据。