【摘 要】
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目的:构建载铜绿假单胞菌DNA疫苗温敏水凝胶系统并评价其诱导的体液及细胞免疫反应水平。方法:利用静电相互作用制备阳离子聚合物/p DNA复合物,通过简单物理混合制备载阳离子聚合物/p NDA复合物的温敏水凝胶系统。分析PLGA-PEG-PLGA水凝胶的相变温度、胶束粒径分布、细胞毒性、细胞摄取、体外释放性能及体内降解情况;分别用PBS、PLGA-PEG-PLGA水凝胶（Hydrogel）、in v
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目的:构建载铜绿假单胞菌DNA疫苗温敏水凝胶系统并评价其诱导的体液及细胞免疫反应水平。方法:利用静电相互作用制备阳离子聚合物/p DNA复合物,通过简单物理混合制备载阳离子聚合物/p NDA复合物的温敏水凝胶系统。分析PLGA-PEG-PLGA水凝胶的相变温度、胶束粒径分布、细胞毒性、细胞摄取、体外释放性能及体内降解情况;分别用PBS、PLGA-PEG-PLGA水凝胶（Hydrogel）、in vivo-jet PEI/p DNA、PLGA-PEG-PLGA+in vivo-jet PEI/p DNA（Gel+in vivo-jet PEI/p DNA）免疫小鼠,评价载铜绿假单胞菌DNA疫苗（p VAX1-Opr F-VP22）PLGA-PEG-PLGA温敏水凝胶系统在体内诱导的体液免疫及细胞免疫水平。结果:20%（w/w）PLGA-PEG-PLGA水凝胶相变温度约32℃,加入不同浓度的PEI/p DNA复合物几乎不影响其相变温度;水凝胶胶束粒径约44 nm,均一分布;PLGA-PEG-PLGA体外对DC 2.4细胞无明显毒性;PLGA-PEG-PLGA胶束可促进细胞摄取阳离子聚合物/p DNA复合物,增强基因的细胞转染效率;负载PEI/p DNA复合物的PLGA-PEG-PLGA水凝胶体外持续释放质粒DNA;水凝胶在体内具有良好的生物可降解性;体内免疫结果表明,与PBS组小鼠相比,Hydrogel组小鼠的Ig G抗体水平、淋巴细胞增殖刺激指数以及IFN-γ水平均无统计学差异,而in vivo-jet PEI/p DNA组及Gel+in vivo-jet PEI/p DNA组小鼠上述三个免疫指标均增加,且Gel+in vivo-jet PEI/p DNA组小鼠增加趋势更加明显。H&E结果显示,水凝胶在体内具有良好的组织相容性。结论:PLGA-PEG-PLGA水凝胶是一种安全有效的体内基因递送载体,可增强铜绿假单胞菌DNA疫苗诱导的体液免疫及细胞免疫水平。
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