目的 白血病是常见的恶性肿瘤之一,其分型80年代以前主要是依照1976年法、美、英三国血液学家制定的FAB(French America British)分型标准,通过细胞形态学和组化染色等手段。FAB分型存在着重复性差、分型对治疗和预后意义不大的缺点。单克隆抗体的应用为白血病的分型开辟了一条新途径,白血病免疫分型较好地克服了形态学分型(FAB分型)的缺陷,可更准确地区分白血病细胞来源及分化阶段。白血病免疫分型的原理基于白血病细胞病变时分化阻滞学说。白血病细胞与正常髓系和淋巴祖细胞一样,会出现某个细胞发育阶段的抗原表达特征。一般认为FAB分型的准确率在60%以上,而免疫学分型可超过90%。另外,免疫分型可以反映FAB分型无法显示的一些生物学特性,如变异型,双表型及ALL(Acute Lymphocytic Leukemia)的分期等,这些都与治疗方案和预后相关,从而为临床治疗提供指导。 现在临床白血病免疫分型主要是在FAB分型不能明确诊断时,进行1～2个抗体的免疫组化检测。由于通过免疫组化进行免疫分型受到标本量、价格的限制,在临床上很难广泛应用。流式细胞仪检测免疫分型准确率达到90%以上,但设备昂贵,耗费材料,需要荧光标记的单克隆抗体,而且一次实验只能分析1-4个CD抗原,也很难在临床普及。 本实验构建一种用于急性白血病免疫分型的细胞芯片,选择固定蛋白能力,且捕获细胞能力强的手臂分子对玻片进行修饰,选择一组合适的抗体,制成微阵列。用构建的细胞芯片对白血病患者静脉血标本进行免疫分型。为临床提供一种简便、快速白血病免疫分型的诊断工具。 方法 1.最佳玻片修饰方法的选择