论文部分内容阅读
目的:明确EBV感染对胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor2,IGF2)编码基因启动子区甲基化、印迹状态及表达的影响,探讨IGF2基因与EBVa GC发生发展的关系。方法:亚硫酸氢盐基因组测序法(Bisufite genomic sequencing,BGS)检测EBV阳性和阴性细胞系以及EBV相关胃癌(EBV-associated gastric carcinoma,EBVa GC)和EBV阴性胃癌(EBV-negatived gastric carcinoma,EBVn GC)组织中IGF2基因启动子区甲基化状态。聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析检测EBVa GC和EBVn GC及癌旁组织标本中IGF2基因印迹状态。实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,real time q PCR)检测EBVa GC和EBVn GC组织中IGF2 m RNA的转录表达;免疫组化技术检测EBVa GC,EBVn GC及癌旁组织中IGF2蛋白表达。结果:(1)BGS结果显示EBV阳性和阴性细胞系中IGF2基因均为高甲基化;EBVa GC组织平均甲基化率为38.17%,EBVn GC组织平均甲基化率为23.06%,统计分析显示EBVa GC组织中IGF2基因启动子甲基化水平明显高于EBVn GC组织(P<0.05)。(2)EBVa GC组织中IGF2印迹缺失率为61.3%(61.3%,19/31);EBVn GC组织中IGF2印迹缺失率为33.3%(33.3%,15/45)。EBVa GC组织中IGF2印迹缺失率高于EBVn GC组织,两者存在显著性差异(χ2=5.803,P<0.05);(3)EBVa GC和EBVn GC组织中IGF2 m RNA转录表达无显著性差异(P>0.05)。(4)IGF2蛋白表达在EBVa GC和EBVn GC组织中无显著差异(P>0.05);胃癌组织中IGF2蛋白明显表达高于癌旁组织(P<0.05)。结论(1)EBV感染可诱发IGF2基因启动子的高甲基化和IGF2基因印迹丢失。(2)未观察到EBV感染、IGF2基因甲基化和印迹状态对IGF2转录和表达的影响,表明IGF2表达的调控机制较为复杂,可能有多种因素的共同调节。(3)胃癌组织中IGF2蛋白的高表达表明其可能参与胃癌的发生发展。