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研究背景代谢综合征发病率不仅逐年增长,且发病逐渐呈年轻化趋势,作为一种新的非传染性疾病,已成为现在世界上的主要健康危害。IR是MetS的主要特征之一,也是它的核心环节。而中医注重整体观和辨证治疗,能够减少西药副作用,控制体质量,改善胰岛素抵抗,但其具体的分子机制尚不明确。近些年的体内外实验研究显示,IR的发生与P13K/AKT信号通路障碍密切相关,多数中药单体、复方或中成药的作用机制与该通路相关,这也成为中医药防治MetS IR的分子机制研究重点。第一章 代谢综合征中医辨证治疗方案探讨目的:探讨MetS中医辨证治疗方案,总结中医证型分布规律。方法:纳入符合研究的MetS患者163例,分为暴露组80例,干预措施为中医辨证方法结合西医基础治疗;非暴露组83例,干预措施为西医基础治疗或联合极少中医辨证治疗,记录诊疗全过程,观察两组基线指标（性别、年龄、体重、腰围等）的均衡性。比较主要疗效指标HOMA-IR,次要疗效指标（空腹血糖、血脂、血尿酸、血压等）。同时对安全性指标（血常规、尿常规、便常规、心电图、肝肾功能）和不良事件进行观察记录,探讨中医辨证治疗对MetS患者的临床疗效及安全性。使用SPSS软件对中药进行频数、聚类和关联的统计和分析。结果:1.纳入研究的163例患者中,以男性居多,占总人数的62.58%,女性占总人数的37.42%。患病年龄以40岁-60岁人群为主。在体重和腰围方面,中西医结合治疗优于西医治疗。以上说明临床要重视诊断为代谢综合征的40-60岁的男性人群,可使用中西医结合治疗,达到改善体质量的目的。2.在胰岛功能方面,中医辨证治疗后HOMA-IR水平呈显著下降趋势,FINS水平未发生明显变化;在糖代谢方面,中医辨证治疗,能够降低血糖,且中西医结合组优于西医组;在脂代谢、血压和血尿酸方面,中医辨证治疗能够改善血脂代谢,纠正紊乱状态,降低尿酸,但对血压的改善不显著;在中医疗效上,中西医结合治疗优势明显。血尿便、肝肾功等指标未见明显异常,未报告不良事件。综合以上结果显示,中医辨证治疗能很好的改善胰岛素抵抗,糖脂代谢和临床疗效等方面。3.对首诊中药处方进行分析,常用药物有柴胡、白芍、茯苓、半夏、苍术、枳实等。药物四气以温、平和微寒最多,药物五味以甘、苦和辛为主,药物归经集中在脾、肝、胃、肺、肾等脏腑。药物功效集中于补虚、活血化瘀、清热、化痰、利水渗湿和理气等。聚类分析显示中药多集中于化痰祛瘀、疏肝行气化湿、气血同调等作用。结合关联规则,发现该研究中多使用行气化湿,化痰祛瘀之药。以方测证,该研究多痰瘀互结证和气滞湿阻证。同时也说明在本研究中,诊断为以上两个证型的患者较多。结论:1.中医辨证治疗结合西医基础治疗安全有效,能够有效的改善临床症状,纠正糖脂代谢异常,降低体重,缩小腰围,改善胰岛素抵抗状态,为临床治疗MetS提供客观依据。2.MetS临床多见痰瘀互结和气滞湿阻证,基础中药有柴胡、白芍、苍术、枳实。本病基本病机以脾虚为主,兼有痰湿、血瘀、热毒等病理因素,为本虚标实之疾病,病位以脾、肝为主,涉及胃、肺、肾。就四气来说,临床多用温性药物为主,兼顾平、微寒;就五味来说,临床多使用甘味药物,兼顾苦、辛。临床多使用补虚药、活血化瘀药、清热药和化痰药等。第二章代综方对代谢综合征患者胰岛素抵抗指数和炎症因子的影响目的:评价代综方干预痰瘀互结证MetS患者IR和炎症因子的临床疗效。方法:纳入使用代综方治疗的痰瘀互结证患者25例,采用自身前后对照的研究方法,比较中医证候治疗前后的疗效（依据痰瘀互结证证候改善程度进行评价）、胰岛功能（血糖、胰岛素和HOMA-IR）、NLRP3炎性小体和炎症因子的疗效。结果:代综方治疗痰瘀互结证患者,经自身前后对照,能显著下调中医证候积分（P＜0.01）,改善代谢综合征患者临床症状。在胰岛功能方面,代综方可以显著降低患者空腹血糖水平、空腹胰岛素水平、HOMA-IR（P＜0.01）检测水平。炎症水平检测结果显示,代综方可降低代谢综合征患者NLRP3、IL-6、IL-1β（P＜0.05）等炎症水平。综合以上结果显示,代综方在改善痰瘀互结证患者的胰岛素抵抗和炎症因子方面具有优势。结论:代综方治疗MetS临床疗效良好,能有效改善痰瘀互结的临床症状,降低血糖和调节胰岛素抵抗状态,为代综方治疗MetS提供依据。通过自身前后对照,发现代综方能够降低NLRP3炎性小体和IL-6、IL-1β等炎症因子水平,从而改善炎症水平,最终达到改善IR的目的。第三章代综方对IR-HepG2细胞胰岛素抵抗的作用目的:探讨代综方对IR-HepG2细胞胰岛素抵抗的作用。方法:通过不同浓度胰岛素诱导人肝癌细胞（HepG2）胰岛素抵抗模型,采用代综方含药血清干预造模成功的细胞,检测细胞活力和葡萄糖消耗量,确定代综方干预的最佳浓度,研究代综方改善IR的作用。结果:经胰岛素处理HepG2细胞36h,诱导结束后,发现模型组细胞活力下降,葡萄糖消耗量呈整体下降趋势,提示胰岛素诱导HepG2细胞出现胰岛素抵抗。与对照组比较,15%浓度代综方含药血清较其他浓度含药血清,差异显著（P＜0.01）,能增加IR-HepG2细胞活力和葡萄糖消耗量。以上结果显示15%浓度代综方含药血清干预效果最佳。结论:代综方能够明显改善IR-HepG2细胞IR,增加细胞活力和葡萄糖消耗量,能有效改善HepG2细胞IR-HepG2细胞状态,促进葡萄糖的吸收。第四章代综方调控PI3K/AKT信号通路改善IR-HepG2细胞的作用机制探讨目的:基于PI3K/AKT信号通路调控NLRP3炎性小体,探讨代综方改善IR-HepG2的可能作用机制。方法:检测对照组、模型组、代综方组和二甲双胍组的IL-6、IL-1β、TNF-α等炎症因子水平,旨在探讨代综方是否能够减轻炎症作用,并设置了不同组别细胞对PI3K/AKT 信号通路中 p-PI3Kp85、p-AKT、p-mTOR、NLRP3、caspase-1、ASC 等蛋白表达情况。并从基因角度观察四组细胞PI3K、AKT、mTOR、ASC、caspase-1、NLRP3 mRNA相对表达量。从细胞层面验证代综方干预IR是否通过PI3K/AKT信号通过路来调控NLRP3炎性小体来实现。结果:1.ELISA结果显示,模型组HepG2细胞较对照组TNF-α、IL-6、IL-1β炎症水平显著升高（P＜0.01）;与模型组比较,代综方组HepG2细胞TNF-α、IL-6、IL-1β炎症水平显著降低（P＜0.01）。以上结果显示,代综方可以有效的改善炎症状态。2.Western Blot结果显示,模型组较对照组p-PI3Kp85蛋白表达明显上调（P＜0.05）,p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著上调（P＜0.01）。代综方组较模型组p-PI3Kp85、p-AKT蛋白表达明显下调（P＜0.05）,p-mTOR蛋白下调,但差异无统计学意义（P＞0.05）。模型组较对照组NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达显著上调（P＜0.01）。代综方组和二甲双胍组较模型组NLRP3、caspase-1、ASC蛋白表达显著下调（P＜0.01）。以上结果显示,代综方能下调 p-PI3Kp85、p-AKT、NLRP3、caspase-1、ASC相关蛋白表达。3.PCR结果显示,与对照组比较,模型组PI3K基因、mTOR基因表达明显升高（P＜0.05）,AKT基因表达无统计学意义（P＞0.05）。与模型组比较,代综方组、二甲双胍组PI3K基因、mTOR基因表达明显下降（P＜0.05）,药物干预AKT基因表达无明显差异（P＞0.05）。与对照组比较,模型组NLRP3基因、caspase-1基因、ASC基因表达显著升高（P＜0.01）。代综方组、二甲双胍组较模型组NLRP3基因、caspase-1基因、ASC基因表达显著下降（P＜0.01）。以上结果显示,代综方能下调PI3K基因、mTOR基因、NLRP3基因、caspase-1基因、ASC基因等表达。结论:IR-HepG2细胞会刺激PI3K、AKT、mTOR磷酸化,增强NLRP3炎性小体、caspase-1蛋白、ASC蛋白和基因的表达。代综方能明显抑制其磷酸化,降低炎性小体蛋白和基因表达和炎症因子水平。