天府肉羊Akirin基因克隆、生物信息学分析及其组织表达规律研究

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肉产量和肉品质都是家畜肉品生产中重要的经济性状,同时也成为了近些年研究的重要领域。Akirin1基因作为受到MSTN基因负调节的下游基因,参与动物胚胎发育、肌卫星细胞增殖分化和骨骼肌受损修复等生理过程。因此Akirin1基因可能通过参与调节骨骼肌生长发育成为新的提高家畜肉产量的候选基因。研究表明Akirin2基因的单核苷酸多肽性(SNP)与日本黑牛和韩国本地牛的大理石花纹评分显著相关,暗示了Akirin2基因可能通过参与调节肌肉中的大理石花纹成为新的改善家畜肉品质的候选基因。本研究运用RT-PCR结合克隆测序方法获得天府肉羊Akirin1基因和Akirin2基因的全编码区序列。Akirin1基因序列长480bp包括426bp的开放阅读框,编码141个氨基酸,序列提交NCBI得到登录号:KF515991。Akirin1氨基酸序列含有11个磷酸化位点,系统进化树分析表明天府肉羊Akirin1基因氨基酸序列与牛和绵羊的Akirin1基因氨基酸序列具有较高的相似性。Akirin2基因序列长660bp包括579bp的开放阅读框,编码192个氨基酸,序列提交NCBI得到登录号:KF515992。Akirin2氨基酸序列含有13个磷酸化位点,系统进化树分析表明天府肉羊Akirin2基因氨基酸序列和牛Akirin2基因氨基酸序列具有较高的相似性。RT-qPCR检测Akirin1基因在270日龄天府肉羊以及Akirin2基因在360日龄天府肉羊8个组织中表达情况。结果显示在8个被检测的组织中均有Akirin1和Akirin2基因表达。Akirin1基因表达水平较高的组织为肺脏和脾脏,表达水平较低的组织为肝脏、肾脏和股二头肌;在背最长肌中,Akirin1基因的表达量随着年龄的增加先升高后降低。Akirin2基因高表达组织为肺脏和脾脏,低表达组织为心肌、肝脏、腹直肌、股二头肌和背最长肌;在背最长肌中,Akirin2基因表达量随日龄的增加先上升后下降。Westren Bloting检测Akirin1蛋白在270日龄天府肉羊与Akirin2蛋白在360日龄天府肉羊8个组织中的表达情况以及天府肉羊5个年龄阶段背最长肌中Akirin1蛋白表达情况。结果显示Akirin1蛋白只在肺脏、股二头肌、腹直肌和背最长肌组织中表达。在肺脏、股二头肌、腹直肌和背最长肌中检测到Akirin2蛋白的表达,心肌、肝脏、脾脏和肾脏中未检测到Akirin2蛋白的表达。天府肉羊5个年龄段背最长肌中Akirin1蛋白的表达水平随日龄的增加先升高后降低。
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