好食脉孢菌发酵醋糟瘤胃降解特性及产类胡萝卜素抗氧化活性的研究

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为使排放量大、营养价值低的醋糟转化为高营养功能饲料,首先进行了好食脉孢菌发酵醋糟试验,并对发酵醋糟体外瘤胃及绵羊瘤胃降解特性进行了研究。然后,对上述发酵产类胡萝卜素工艺、提取方法及抗氧化活性进行了系列研究。1.与未发酵醋糟组相比,好食脉孢菌发酵醋糟组体外瘤胃降解特性如下:两组累计产气量均表现为GP24h48h72h(P<0.05),发酵醋糟组GP24h、GP48h、GP72h和ME均显著升高(P<0.05),CH4浓度、DMD、NDFD和ADFD均显著降低(P<0.05),VFA、NH3-N、蛋白氮、尿素氮和总氮含量差异均不显著(P>0.05)。2.利用尼龙袋法评定了醋糟发酵前后营养价值的变化,结果显示,与未发酵醋糟组相比,好食脉孢菌发酵醋糟组DM有效降解率显著升高(P<0.05),CP和NDF的有效降解率显著降低(P<0.05),而ADF有效降解率差异不显著(P>0.05)。3.用响应面Box-Behnken设计法,优化了好食脉孢菌发酵醋糟产类胡萝卜素的工艺条件,并研究了几种发酵助剂对好食脉孢菌类胡萝卜素产量的影响。结果显示,最优发酵条件为:接种量8%(100 g醋糟培养基干基中添加8 ml好食脉孢菌种子液,种子液浓度为1.4×106 CFU/ml),含水量58%,29℃发酵85 h,在此条件下类胡萝卜素产量达68.05 mg/kg。在好食脉孢菌发酵醋糟培养基中添加一定量番茄汁、桔子皮、金属离子(Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、K+)和维生素(VB1、VB2、VC)等发酵助剂,均可提高类胡萝卜素产量,其中,桔子皮的作用最显著,在1 kg醋糟培养基中添加桔子皮4.2 mg,类胡萝卜素产量最大,达119.85 mg/kg,是对照组(67.01 mg/kg)的1.79倍。4.用单因素试验对好食脉孢菌孢子破壁方法及类胡萝卜素抽提溶剂进行了筛选,并在此基础上,以乳酸浓度、乳酸用量、振荡时间及沸水浴时间4个主要因素为自变量,以类胡萝卜素提取量为因变量,运用Box-Behnken分析法,对好食脉孢菌中类胡萝卜素提取工艺进行了优化。结果显示:乳酸热破壁法是好食脉孢菌破壁最适宜方法,体积比2:1的乙酸乙酯与无水乙醇混合液是最佳的类胡萝卜素抽提溶剂。好食脉孢菌破壁工艺参数优化组合为乳酸浓度2.8 mol/L,乳酸用量14 ml/g,振荡时间20 min,沸水浴时间8 min;在此条件下,类胡萝卜素提取量为793.75 mg/kg。5.体外抗氧化试验结果显示,好食脉孢菌发酵醋糟产类胡萝卜素抗氧化能力与其浓度(5200μg/ml)呈正相关,其对DPPH、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力显著高于同浓度β-胡萝卜素、VC和VE(P<0.05)。此外,该发酵所产类胡萝卜素还具有抑制脂类物质氧化及金属离子螯合能力。上述试验结果表明,好食脉孢菌发酵不仅可提高醋糟的营养价值,而且可产生具有较强抗氧化活性的类胡萝卜素,本研究为研发醋糟类胡萝卜素功能饲料奠定了基础。
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