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沙门氏菌是最常见的人畜共患病原菌之一，鼠伤寒沙门氏菌又是在沙门氏菌感染中常居首位，主要侵袭回肠、结肠，甚至整个胃肠道，常引起小肠结肠炎，在小儿的沙门氏菌感染中最为常见。该病潜伏期一般为8～48h，起病急，多以腹泻、发热起病；由于体质差异，该病轻重缓急不尽相同。因此，建立一个针对鼠伤寒沙门氏菌感染的快速、高灵敏度的半定量检测方法对沙门氏菌病的临床诊断具有重要意义。本论文以破碎的鼠伤寒沙门氏菌抗原免疫雄性新西兰大白兔，制备抗鼠伤寒沙门氏菌多克隆抗体。经过4次免疫以及1次加强免疫，获得抗血清，采用辛酸硫酸铵沉淀法纯化，并通过间接ELISA测得抗体效价为106。通过SDS-PAGE电泳实验对抗体进行评价，有部分杂带，但重链与轻链明显，重链约50kD，轻链约25kD。用间接ELISA方法对13种菌进行特异性实验，该多抗仅与属内菌株及大肠杆菌O157:H7出现交叉。在荧光免疫层析平台，利用双抗体夹心的免疫学原理将抗体进行配对，最终选择多抗的自配对，并对试纸条进行条件优化。在最优条件下制备的试纸条，检测限为3.162×10~6cfu/mL，定量限为4.082×10~6cfu/mL；三批试纸条对鼠伤寒沙门氏菌菌液浓度对数lgc的回收率均在96%~101%之间，其中对高浓度菌液的浓度回收率在80%~120%之间，对低浓度菌液的浓度回收率也达到60%以上；T值、C值、T/C值的板内及板间变异系数均在5%以内。在免疫磁分离平台，选用微米级羧基端磁珠XMag-COOH，经EDC和NHSS活化，并偶联多抗得抗鼠伤寒沙门氏菌免疫磁珠。确定最佳偶联条件为，向每0.5mg磁珠中添加100μg抗体，于37℃pH6.010mM MES缓冲液体系中偶联2h，并用1%BSA的PBST对免疫磁珠进行封闭。富集实验时，向1mL菌液中加入0.5mg免疫磁珠，在37℃条件下混合45min。最佳洗脱条件为用pH2.60.2M磷酸-柠檬酸缓冲液洗脱5min，并用Tris-HCl调体系pH至7.0左右后进行荧光层析实验，测得洗脱回收率为45%左右。本论文针对鼠伤寒沙门氏菌建立了免疫磁分离技术结合荧光免疫层析技术的快速检测方法。荧光免疫层析检测模拟样本的回收率在60%~170%之间，联合检测模拟样本时回收率在38%~55%之间，即实际富集倍数可达55倍，灵敏度至少可达105cfu/mL。