HL-60细胞培养上清液对人脐带血单个核细胞增殖分化的影响

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目的:白血病细胞能够通过自分泌方式分泌细胞因子而作用于自身,使细胞大量的增殖:白血病细胞所分泌的细胞因子也能作用于人脐带血(UcB)单个核细胞(MNCs)中的CD34+/CD133+细胞亚群使之增殖。关于HL-60细胞(急性早幼粒白血病细胞)培养上清液能否使UCB-MNCs增殖尚未见报道,本实验主要目的是观察HL-60细胞培养上清液对人UCB-MNCs增殖分化的影响。 方法:实验分为①有HL-60细胞培养上清液+stemSpan(R)SFEM组;②StemSpan(R)SFEM组:③HL-60细胞培养上清液+高糖(HG)-DMEM组:④HG-DMEM组;⑤HL-60细胞培养上清液+低糖(LG)-DMEM组;⑥LG-DMEM组。收分离的人UCB-MNCs按2.5×106/瓶分别接种于6组培养液中,37℃,5%CO2,饱和湿度培养,分别于第3,第6,第9,第12天计细胞总数,于培养前和培养12天用流式细胞仪(FCM)分析表型CD34,CD90和CD1466的变化。 结果:①培养至第3天,HL-60细胞培养上清液+StemSpan(R)SFEM组和StemSpan(R)SFEM组MNCs数较培养前和其余各组明显升高(均P<0.05),至第9天细胞数维持在较高水平:②HL-60细胞培养上清液+StemSpan(R)SFEM组和StemSpan(R)SFEM组各时点上,前者MNCs数量较后者有所增加,但无统计学意义(P>0.05);③添加HL-60上清的高糖组和低糖组,各时点上的MNCs数均较相应的对照组升高(均P<0.05):④各实验组CD34,CD34/CD90和CD166阳性细胞百分比均较培养前升高。 结论:HL-60细胞培养上清液对人UCB-MNCs具有一定的增殖作用,其有效生物活性物质有待进一步研究。
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