由金黄色葡萄球菌肠毒素B基因所编码的B型肠毒素(SEB)是引起食物中毒的重要毒素，也是重要的生物战剂之一，本文以SEB基因为检测目标基因，以固定有特异识别SEB基因的寡核苷酸探针的双层类脂膜(BLMs)为敏感分子识别元件；利用膜片钳放大器系统对细胞膜上离子通道跨膜电流变化极其灵敏的特点，研究并构建一种新型的膜片电极支撑BLMs核酸传感器，对SEB基因进行快速、灵敏和特异的检测。主要研究内容如下： 1．优化了成膜液的组成及配比，研究了新型膜片电极支撑的双层类脂膜的制备。用膜片钳系统记录BLMs在膜片电极尖端形成的I-V直线图并可在光学显微镜下(10x40)观察成膜后的情况。用在膜中嵌入短杆菌肽离子通道蛋白的方法，对所制备BLMs的真实性进行确证。 2．利用生物信息学方法设计了对SEB基因有良好特异互补配对的寡核苷酸探针，采用直链烷烃链C12对其5’端进行修饰(C12-ssDNA)，可提高探针在BLMs上的固定能力。 3．研究了序列不同的寡核苷酸探针及不同浓度C12-ssDNA探针在膜片电极支撑BLMs上固定所产生的电流响应情况。E12修饰过的探针响应远较未修饰的良好。50mV静电位下，电流响应值和不同浓度的寡核苷酸探针呈正相关。实验选定以浓度为273．65ng／mL的Ci2-ssDNA固定于BLMs上作为膜片电极支撑BLMs核酸传感器的生物敏感元件。传感器测得的电流与施加阶跃电压呈良好的线性关系。 4．对膜片电极支撑BLMs核酸传感器检测SEB基因进行研究。传感器可定量检测SEB基因的范围是20~5000ng／mL。在特异性检测方面，传感器对其它金葡菌株和食品污染致病菌菌株的基因组DNA无明显电信号反应。同时，对传感器BLMs表面微观结构，即空白BLMs、固定寡核苷酸探针的BLMs和杂交洗脱后的BLMs分别进行AFM扫描和比较。 5．在以上工作基础上，本研究制备的BLMs核酸传感器对污染牛奶样品中产SEB金黄色葡萄球菌菌量的最低检测限为102cfu／mL，可初步用于对菌量的定量检测。