革兰氏阴性细菌脂多糖转运蛋白LptB2FG结构与功能研究

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脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)是革兰氏阴性细菌外膜的主要组成成分,它形成阻止大多数疏水抗生素进入细菌的天然屏障并保障细菌在恶劣环境下的生存。同时,LPS会导致炎症和引起人体的天然免疫反应。细菌脂多糖主要由三部分组成:lipidA、核心寡糖和O-抗原多糖。它的跨膜转运以及在外膜上的组装主要由七个脂多糖转运蛋白(LptA-G)负责完成。其中,LptB,LptF和LptG组成的四聚体ABC转运蛋白LptB2FG位于内膜上,负责从内膜外小叶抽提LPS,并通过LptC和LptA将LPS传递给位于外膜上的LptDE复合体,最后由LptDE完成LPS插膜组装。LPS为所有革兰氏阴性细菌生存所必需,因此对脂多糖分子转运与组装相关蛋白复合体的结构和功能研究,不仅可以加深对革兰氏阴性细菌外膜的生成机制的理解,也可以为研发新型抗生素提供一定的理论基础。  利用X-射线晶体学,我们解析了铜绿假单胞菌来源的LptB2FG复合体的3.46(A)的晶体结构。在解析的LptB2FG复合体结构中,LptF和LptG各包含一个跨膜结构域(TMD),一个周质侧β-jellyroll结构域和一个与LptB相互作用的α螺旋。内膜上的LptF和LptG的跨膜结构域形成一个较大的向外“V”型空腔,结构分析和功能实验初步表明LPS可能从LptF和LptG跨膜结构域的膜侧间隙进入“V”型空腔,在LptB结合和水解ATP提供能量基础上,通过构象变化将LPS转运到β-jellyroll结构域中,完成LPS从内膜的抽提过程。我们通过对LptB2FG复合体结构和功能的分析,初步揭示了这种新型的ABC转运蛋白从内膜抽提脂多糖分子的分子机理,并定义LptB2FG为一类区别于TypeⅠ和TypeⅡABC exporter的TypeⅢ型ABC exporter。
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