蜂胶是由蜜蜂采集的树脂和其腺体分泌物等形成的一种黏性胶状固体物质。目前有关中国湖北孝感蜂胶方面的研究尚未见相关文献报道。黄酮类化合物是蜂胶中的重要活性物质,它们具有抗氧化、抗微生物、抗癌和免疫调节等多种生物活性。近年来,蜂胶黄酮的抗癌活性日益受到关注并成为研究热点,然而大多数研究都是集中在蜂胶黄酮粗提物或高良姜素和白杨素等单体的活性上,关于短叶松素-3-乙酸酯（PB3A）抗肿瘤活性方面的研究鲜见报道,PB3A对肝癌细胞的毒性作用及其作用机制尚不完全清楚。本论文主要研究了蜂胶黄酮的提取、分离纯化和抗氧化活性以及PB3A的抗肿瘤活性,以期为蜂胶黄酮资源的深度开发利用提供科学依据和理论指导。其主要内容及研究结果如下:1.本文以湖北孝感蜂胶为原料,采用超声强化提取蜂胶总黄酮,考察超声功率、超声时间和乙醇浓度对蜂胶总黄酮提取得率的影响,并采用响应面法优化超声提取工艺条件。实验结果表明,超声强化提取的最佳工艺条件为:超声功率为150 W,超声时间为16 min,乙醇浓度为86%,在该条件下的蜂胶总黄酮提取得率为21.10±0.075%（n=3）。2.采用液质联用技术从蜂胶的醇提物中共鉴定出8种黄酮类化合物和2种酚酸类化合物,分别是槲皮素（m/z 301[M-H]^-）、异鼠李素（m/z 315[M-H]^-）、山奈酚（m/z 285[M-H]^-）、高良姜素（m/z 269[M-H]^-）、柯因（m/z 253[M-H]^-）、松属素（m/z 255[M-H]^-）、短叶松素（m/z 271[M-H]^-）、短叶松素-3-乙酸酯（m/z 313[M-H]^-）、咖啡酸（m/z179[M-H]^-）、咖啡酸苯乙酯（m/z 283[M-H]^-）。3.采用制备液相色谱法对蜂胶黄酮类物质进行分离纯化,再利用多种分析技术对分离纯化得到的白色晶体进行纯度分析和结构鉴定。结果表明,通过液相色谱法确定白色晶体（化合物1）的纯度为96.82%,通过质谱、紫外光谱、红外光谱和核磁共振波谱等多种技术确定化合物1为短叶松素-3-乙酸酯。4.采用自由基清除实验研究蜂胶黄酮的抗氧化活性。结果显示,DPPH·、O₂^-·和ABTS⁺·的清除率都随着蜂胶黄酮浓度的增加而增大,蜂胶黄酮清除DPPH·、O₂^-·和ABTS⁺·的IC₅₀值分别是0.038、0.746和0.006 mg/mL,表明蜂胶黄酮具有一定的DPPH·、O₂^-·和ABTS⁺·清除能力,因此说明蜂胶黄酮具有一定的抗氧化活性。5.采用细胞毒性检测实验（MTT法）研究PB3A对人肝癌细胞Hep G2、人宫颈癌细胞Hela、人肺癌细胞NCI-H460和人正常肝细胞LO2的毒性并通过细胞划痕、AO/EB双染和Hoechst 33258染色等实验研究PB3A对HepG2细胞迁移能力及其形态的影响,然后采用caspase-3活性检测实验研究PB3A诱导HepG2细胞凋亡的作用机制。细胞毒性检测结果显示,PB3A能够显著地抑制HepG2、Hela和NCI-H460细胞的生长,PB3A对HepG2、Hela和NCI-H460细胞的IC₅₀值分别是79.2、133.5和148.3μM,PB3A对LO2细胞的毒性作用较弱,其IC₅₀值为2245.4μM,这些结果表明PB3A对HepG2、Hela和NCI-H460细胞有较强的毒性作用而不损伤正常肝LO2细胞。细胞划痕愈合结果显示,药物处理组的细胞迁移速率减慢,表明PB3A能够降低Hep G2细胞迁移能力。AO/EB双染和Hoechst 33258染色结果表明,药物处理组的细胞发生了核DNA凝聚固缩等形态学变化,因此说明PB3A通过细胞凋亡的途径诱导Hep G2细胞死亡。caspase-3活性检测结果显示,药物处理组的Hep G2细胞caspase-3活性增强,表明PB3A可能通过激活caspase-3蛋白酶的途径诱导HepG2细胞凋亡。