目的:斜叶檀,来源于豆科蝶形花亚科黄檀属植物斜叶黄檀Dalbergiapinnata含树脂的木质藤茎,为海南黎、苗族人民口口相传至今的民间常用药,被用于泡酒或单方应用,治疗跌打损伤、烧烫伤、毒虫叮咬等多种疾病,具有悠久的民间药用历史。近年来,随着中医药研究人员及各地香商的介入,斜叶檀药用、香用价值被广泛开发,然而由于人们保护意识及认知不足,斜叶檀野生资源被肆意破坏,其药用功效过分夸大,市场商品真伪混杂、规格混乱。为保护斜叶檀药用资源,研究斜叶檀药用功效,规范斜叶檀商品规格,本文拟对斜叶檀质量标准进行初步研究,内容包括:资源调查、原植物形态鉴定、性状鉴定、显微鉴定、商品规格、薄层鉴别、检查(总灰分)、浸出物测定、挥发油含量测定等,并对其四个主产地(海南、云南、缅甸、老挝)101份商品进行挥发油组分对比分析鉴别,筛选其挥发油中标志性差异代谢物。此外,还进行了其治疗小鼠腿部急性闭合性软组织损伤的初步药效实验,最终拟定斜叶檀质量标准草案,主要内容及结果如下。方法:1、产地及商品调查采用实地(海南、云南)调研,民间、市场走访调查的方式对斜叶檀资源分布、商品规格进行研究,并查阅大量植物志、药用植物名录、植物资源志要等资料系统性研究了斜叶檀植物资源分布特征。2、组织形态学研究采用传统眼看、手摸、鼻闻、口尝的方法对斜叶檀外观形状、表面颜色、气、味、质地、断面等进行鉴定;采用植物组织制片方法对斜叶檀横、弦、径三切面,粉末特征及解离组织进行鉴定。3、化学成分定性检识及薄层检识采用试剂法、显色法对斜叶檀化学成分进行定性检识;采用薄层色谱法对斜叶檀挥发油进行鉴定,以石油醚:氯仿:乙酸乙酯(4:6:0.4)为展开系统,榄香素及甲基丁香酚为对照品,1%茴香醛浓硫酸与无水乙醇(1:9)混合溶液为显色剂,建立斜叶檀薄层色谱检识系统。4、总灰分检查、浸出物及挥发油含量测定按照《中国药典》2015版四部项下方法,对国产、进口斜叶檀各12批样品进行了总灰分、水浸出物、醇浸出物及挥发油含量进行检查测定,采用GC法对斜叶檀挥发油中榄香素及甲基丁香酚含量测定。5、挥发油组分及产地差异分析采用GC-MS法对四个产地101份斜叶檀样品进行挥发油成分分析,将预处理结果导入SIMCA-P软件进行数据主成分(PCA)分析、正交偏最小二乘法判别(OPLS-DA)分析,对比不同产地斜叶檀间差异,筛选其标志差异产物,对其产地进行鉴别。6、挥发油治疗小鼠腿部急性闭合性软组织损伤实验采用“定量化重力打击法”多次打击小鼠腿部同一位置复制急性闭合性软组织损伤模型,40只昆明小鼠均分为四组:正常组、模型组(生理盐水)、阳性组(扶他林)、药物组(斜叶檀挥发油)。治疗过程中连续测定其腿部肿胀值,评价其消肿能力。4天后处死实验动物,观察局部损伤症候、受损肌肉组织形态学。结果:1、斜叶檀原植物资源广泛分布于我国海南、广东、广西、云南、西藏等地,及缅甸、老挝、马来西亚、印度尼西亚(爪哇、加里曼丹)、菲律宾、尼泊尔、锡金等地,均为野生资源。其结香原理与沉香相似,均为受伤结香。商品斜叶檀以海南、缅甸、老挝所产为主,少见云南斜叶檀。常见规格等级分类有采收状态分类法(生结、倒架、土埋)、质地分类(糖结、软油、硬油、黄金甲)、颜色分类(白油、红油、黄油、紫油、黑油)及产地分类法等。多以黄金甲、软油、糖结者价格为高。2、斜叶檀呈不规则长条形圆柱状;表面常有黑色树脂斑纹,颜色有白、红、黄、紫、黑等;横切面木射线宽多1列,稀2列;导管多,单管孔或2-7个径列复管孔,直径41-340μm,轴向薄壁组织傍管带状;弦切面木射线呈梭形,宽1-2列细胞,高5-11个细胞,细胞壁连珠状增厚。径切面木射线横向带状,与木纤维垂直相交。3、定性检识表明,斜叶檀中含挥发油、黄酮、鞣质、皂苷、蒽醌等成分;薄层色谱检识表明,石油醚:氯仿:乙酸乙酯(4:6:0.4)展开系统重复性、稳定性均较好,对斜叶檀品种鉴定、产地鉴别有一定的指导意义。4、根据检测结果及实际生产应用,拟定其总灰分不得超过3.0%,水分不得超过8.0%,水浸出物不得低于2.0%,醇浸出物不得低于35.0%,挥发油含量不得低于0.3%(mL/g),榄香素含量不得低于6.0mg/mL,甲基丁香酚含量不得低于 0.1mg/mL。5、基于GC-MS法采用simca-p14.1软件可对不同产地斜叶檀挥发油组分进行一定程度的区分,为其产地鉴别提供参考。6、经动物药效学实验表明,斜叶檀挥发油对小鼠腿部的急性软组织损伤具有良好的消肿散淤作用。结论:通过以上研究表明,海南黎药斜叶檀产地分布广泛,用药历史悠久,功效明确。不同产地斜叶檀在薄层色谱,浸出物,挥发油组分、含量上均存在一定差异。本研究首次从多水平、多角度对黎药斜叶檀进行考察,为黎药斜叶檀的质量控制、产地鉴别提供了理论依据,为斜叶檀质量标准的制定奠定了基础,为开发黄檀属系列药用植物资源提供参考。