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目的:心房颤动(atrial fibrillation, AF)是临床实践中最常见的快速性心律失常之—,其确切机制目前尚不明确。近年来研究发现,自主神经系统在AF的发生维持中起了关键作用,自主神经系统通过释放乙酰胆碱和去甲肾上腺素等相应神经递质,影响心房肌细胞电生理活动,诱发各种心律失常。近年的动物实验及临床研究表明,肾素-血管紧张素系统(rennin-angiotensin system, RAS)与AF密切相关。RAS在AF的发作和维持中起了重要作用。研究显示,RAS与AF心房重构密切相关。血管紧张素-(1-7) [Ang-(1-7)]是RAS系统的重要—员,研究发现Ang-(1-7)有拮抗血管紧张素Ⅱ(Angiotensine Ⅱ,AngⅡ)的作用,能够拮抗起搏造成的心房不应期缩短及频率适应性下降,抑制心房纤维化。我们的前期实验通过建立长期快速心房起搏犬模型证实Ang-(1-7)对心房结构重构和电重构有抑制作用,但Ang-(1-7)对心房神经重构是否有保护作用目前尚不明确。为进—步探讨房颤心房神经重构以及Ang-(1-7)是否对心房神经重构有保护作用,本研究建立长期快速心房起搏犬房颤模型,观察心房神经重构以及Ang-(1-7)的保护作用。方法普通杂种犬18只随机分为3组对照组(Sham, S组)、心房起搏组(Pacing ,P组)和心房起搏+Ang-(1-7)组[Ang-(1-7) , A组]。所有犬均植入心房起搏器,S组犬仅植入起搏器但不行起搏刺激,P组和A组犬予500bpm持续快速右心房起搏2周。实验过程中A组犬经左颈外静脉持续泵入Ang-(1-7) 6μg·Kg-1·h-1。2周起搏过程结束后,关闭起搏器,将6对双极记录电极分别缝于高、低位左心房外膜,高、低位右心房外膜,左、右心耳;将4对双极记录电极缝于四条肺静脉心房起始处,即左上、下肺静脉和右上、下肺静脉。利用多导生理记录仪,采用心脏程序期前刺激法(S1S2)测量3组犬基础起搏周长为250 ms时的心房有效不应期,记录AF诱发率及持续时间;分离双侧星状神经节,刺激双侧交感神经使心率至少升高30%后再次测定心房有效不应期、AF诱发率及持续时间,观察交感神经对心房电生理的影响;分离颈部迷走交感神经干,予电刺激心房率降低至少50%后再次测定心房有效不应期、AF诱发率及持续时间,观察迷走神经对心房电生理的影响。电生理实验后取心房肌组织行免疫组织化学染色,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)阳性神经纤维代表交感神经,胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase, ChAT)阳性神经纤维代表迷走神经,观察TH和ChAT阳性神经纤维在心房肌中分布、密度的变化情况。取心房肌组织行Western-blotting 测定 TH、ChAT 及热休克蛋白 27 (heat shock protein,HSP27)蛋白表达情况,行Real-Time PCR研究,观察TH、ChAT、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)及 HSP27 mRNA 表达水平的变化。结果:1.植入起搏器2周后,P组犬较S组犬各测定点心房有效不应期均明显缩短,AF诱发率及持续时间均明显增加;A组犬Ang-(1-7)治疗后改善了起搏诱发的心房有效不应期缩短、AF诱发率及持续时间的增加。S组犬交感神经刺激后虽心率明显增快,但心房有效不应期及AF诱发率没有明显的变化;P组犬交感神经刺激后各测定点心房有效不应期均明显缩短,AF诱发率及持续时间均明显增加;A组犬Ang-(1-7)干预后改善了交感神经刺激引起的心房有效不应期缩短及AF诱发率和持续时间的增加。迷走神经刺激使3组犬心率及心房有效不应期均显著降低,AF诱发率及持续时间均明显增加,三组间没有统计学差异。2.在蛋白水平,S组犬左房心房肌TH表达高于右房;P组犬左右心房肌TH表达水平均明显升高,右房TH表达量升高的趋势高于左房;P组HSP表达水平明显高于S组;P组ChAT蛋白表达水平没有明显变化。A组犬Ang-(1-7)治疗显著改善了起搏诱发的TH、HSP27表达水平升高。在基因水平,P组TH、NGF、HSP27 mRNA表达水平较S组均明显升高,ChAT mRNA表达水平没有明显变化;A组犬Ang-(1-7)治疗后显著改善了起搏所诱发的TH、NGF、HSP27表达水平的升高。3.免疫组织化学染色发现P组犬TH阳性神经纤维密度较S组明显增加,A组犬Ang-(1-7)干预后TH阳性神经纤维密度较P组降低。三组犬ChAT阳性神经纤维密度没有明显变化。心房肌组织HE染色和Masson染色发现起搏组犬心房肌细胞形态发生改变,心肌细胞肿胀、大小不整、排列紊乱,心房肌间质有纤维组织增生,A组犬Ang-(1-7)治疗显著改善了起搏所诱发的上述形态异常改变。结论:心脏交感神经和迷走神经对心房电生理的作用受心脏基础状态的影响,交感神经刺激明显提高快速心房起搏犬AF诱发率,而对正常犬影响小;迷走神经刺激能提高正常犬和起搏犬的AF诱发率。快速心房起搏能引起心房发生交感神经重构,对迷走神经却没有明显影响。Ang-(1-7)不仅对快速心房起搏所诱发的心房电重构和结构重构有保护作用,对心房交感神经重构也同样有保护作用。快速心房起搏引起心房HSP27表达增加,HSP27可能对心房交感神经重构有保护作用。