微生物谷氨酰胺转胺酶(Microbial Transglutaminase,简称MTG,EC 2.3.2.13)能催化多种蛋白质分子间、分子内的酰基转移反应,改善各种蛋白质的功能性质,在食品、化妆品、制药等工业领域具有广阔的应用前景。本研究以提高吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)WSH03-13发酵产谷氨酰胺转胺酶的产量为目标,分别研究了吸水链霉菌的高密度培养和溶氧浓度对发酵过程的影响并通过不同的诱变手段来筛选高酶活的菌株。主要内容如下:1.对吸水链霉菌的高密度培养进行了研究。通过考察不同初始葡萄糖浓度下的分批发酵,确定了最佳初始葡萄糖浓度为10 g/L。通过比较了不同的流加速率,确定在8-16 h采用较高的的比生长速率(0.15 h-1),后期降低比生长速率(0.10 h-1)这种较优的葡萄糖流加速率组合可以获得较高的菌体量。2.考察了添加氮源对Streptomyces hygroscopicus发酵产酶的影响。在菌体生长到最大值后添加氮源,促进产酶。实验结果表明,添加50 g/L的豆饼粉酶活最高可达到5.79 U/mL。3.在3 L罐中考察了不同的溶氧浓度对谷氨酰胺转胺酶分批发酵的影响,确定了在0-20 h保持30%的溶氧浓度,通气量1.25vvm;20 h后保持10%的溶氧浓度,通气量1.25vvm的条件来进行发酵,最终酶活可达到5.88 U/mL,实现了谷氨酰胺转胺酶的高产量、高生产强度的统一。4.采用N+注入、紫外照射等常规诱变手段,并筛选抗2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)突变株。由此分离纯化获得的高产菌株DG-1具有抗葡萄糖代谢阻遏的能力。最高酶活可达到8.19 U/mL,比出发菌株提高了96%。