匙羹藤总皂甙的分离及其环糊精包合物制备的研究

来源 :江苏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bae2009
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匙羹藤(Gymnema sylvestre (Retz.)Schult,简称GS)为萝蘑科匙羹藤属(Gymnema R.Br.)类植物,又称武靴藤、羊角藤、金刚藤,主要含有皂甙、萜类、黄酮、多肽、果胶、生物碱等化学成分,其主要活性成分是三萜皂甙类物质,又称匙羹藤酸(Gymnamic acid,简称GA)。研究表明,匙羹藤叶提取物具有降血糖、降血脂、抗龋齿、抑制甜味和抑制肥胖等作用,可用来防治糖尿病和肥胖症,因此无论是作为药品还是保健食品,都具有很好的应用前景。 日本、美国和印度已经研究开发出一系列预防、治疗糖尿病和肥胖症等的匙羹藤产品,我国匙羹藤资源丰富,虽有有关研究报道,但对其的研究丌发利用少,并且匙羹藤提取物具有苦味,影响了其产品的应用。因此,本论文以匙羹藤叶为原料,对匙羹藤总皂甙的提取、分离纯化及定性定量分析进行了较为深入的研究;采用包合技术掩蔽匙羹藤提取物的苦味,对匙羹藤总皂甙-β-环糊精包合物的制备进行了研究,主要研究内容和结果如下: 1、研究了醇提法提取匙羹藤总皂甙工艺条件。以匙羹藤总皂甙粗提物得率为考察指标,采用四因素三水平正交试验法优选了提取工艺,得最佳提取条件为浓度70%乙醇、料液比1∶6、提取时间3h、提取次数2次,总皂甙粗提物得率为9.4%;四因素对总皂甙粗提物得率的影响主次顺序为提取次数>乙醇浓度>提取时间>料液比。 2、对匙羹藤总皂甙的薄层色谱分析法和分光光度分析法进行研究。选定结构类似物甘草酸单铵盐为对照品,氯仿∶甲醇∶水(6.5∶3.5∶1下层v/v)为展丌剂,进行薄层色谱定性鉴别,匙羹藤酸的Rf值为0.63,经5%的硫酸.乙醇显色后,显紫红色斑点,与文献报道一致。GA和甘草酸均为齐墩果烷型三萜皂甙,分子量相近,并且经香草醛一冰醋酸和高氯酸(1∶4)混合液显色后均在545nm附近有最大吸收,在此波长下测得标准曲线为A=0.0006C+0.3305,相关系数R=0.996,线性范围40~160μg/mL,精密度试验RSD值为1.18%(n=5),实验在120min内测得的吸光度值稳定,加样回收率为101.70%,RSD值为2.59%(n=5),该方法精密度和稳定性较好,可用于缺乏匙羹藤酸对照品时匙羹藤总皂甙的含量测定。 3、对树脂吸附法分离纯化匙羹藤总皂甙进行了研究。考察了D101、NKA和AB-8三种树脂对匙羹藤总皂甙的平衡吸附量,发现树脂D101的吸附效果最好,其吸附量为93.90mg/g;对其静态吸附进行考察,得到了吸附等温线和吸附动力学曲线,对吸附等温线进行了线性拟合,结果表明Langmuir方程能很好的描述D101树脂的吸附行为,吸附动力学曲线和吸附速率曲线表明,吸附8h左右达到平衡,且在2.5h以后吸附速率逐渐平稳;对洗脱剂进行考察,发现50%乙醇的洗脱效果较好;考察了动态吸附过程中流速和进样浓度对D101树脂吸附量的影响,结果表明进样浓度为7.73 mg/mL、流速为1.5mL/min时较适宜,因此,D101树脂吸附分离纯化匙羹藤总皂甙的最佳分离条件为进样浓度7.73mg/mL、流速1.5mL/min、洗脱剂50%乙醇。 匙羹藤总皂甙粗提物经D101树脂吸附分离纯化后,匙羹藤总皂甙纯度由纯化前的19.05%提高到56.10%,得率为83.83%。 4、对匙羹藤总皂甙-β-环糊精包合物的制备进行了研究。采用饱和水溶液法制备匙羹藤总皂甙-β-环糊精包合物,单因素试验和正交试验结果均表明,最佳包合条件为β-CD与匙羹藤总皂甙投料比1∶1、包合温度50℃、包合时间3h;匙羹藤总皂甙、β-环糊精和包合物的扫描电镜考察表明,包合物为细棒状晶体,与匙羹藤总皂甙和β-环糊精均有明显区别;对β-CD、匙羹藤总皂甙、β-CD与匙羹藤总皂甙混合物和匙羹藤总皂甙-β-CD包合物的红外光谱分析,形成的包合物与匙羹藤总皂甙图谱相比,吸收强度减弱;X射线衍射分析结果表明,包合物的衍射峰明显少于混合物,且出现了新的晶面间距值,证明了匙羹藤总皂甙-β-CD包合物的形成;稳定性试验结果表明,包合物稳定性良好,可克服易吸潮和有苦味等不足。饱和水溶液法制备匙羹藤总皂甙-β-环糊精包合物操作简便,成本低,对设备要求不高。
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