【摘 要】
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广泛存在于许多动物口腔、呼吸道的多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）可引发出血性败血症、禽霍乱等疾病。本研究从猪场采集的181份健康猪鼻拭子中分离到3株Pm（Pm-41、Pm-104和Pm-162）,从送检鹅、鸡、兔病料中分离出3株禽源Pm（Pm-A、Pm-B和Pm-C）和1株兔源Pm-D。通过对Pm的capA、capB、capD、capE和capF基因进行PCR扩增
【基金项目】
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安徽省教育厅重点项目（KJ2016A822）； 安徽科技学院校级稳定人才项目（DKWD201801）；
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广泛存在于许多动物口腔、呼吸道的多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）可引发出血性败血症、禽霍乱等疾病。本研究从猪场采集的181份健康猪鼻拭子中分离到3株Pm（Pm-41、Pm-104和Pm-162）,从送检鹅、鸡、兔病料中分离出3株禽源Pm（Pm-A、Pm-B和Pm-C）和1株兔源Pm-D。通过对Pm的capA、capB、capD、capE和capF基因进行PCR扩增后发现有5株属于A型（Pm-41、Pm-A、Pm-B、Pm-C和Pm-D）,1株B型（Pm-104）和 1 株 D 型（Pm-162）,没有 E、F 型 Pm。药敏试验结果表明,各菌株对检测的13种药均表现不同程度的抗性,其中Pm-162的耐药性最强,仅对多粘菌素B敏感,大多数猪源Pm（CVCC401、CVCC438、CVCC1662、CVCC1657、Pm-41、Pm-104、Pm-162）对四环素、克林霉素、卡那霉素的耐药性较强,对阿米卡星、氧氟沙星、头孢拉定、多粘菌素B、庆大霉素敏感性较高。禽源Pm（Pm-A、Pm-B、Pm-C）对复方新诺明和四环素存在耐药性,对环丙沙星、多粘菌素B、氧氟沙星敏感。兔源Pm（Pm-D）除了对复方新诺明、四环素、克林霉素耐药以外,对其他的10种药物均高度敏感。对临床分离的7株Pm和中国兽药监察所购入的4株Pm的23个毒力基因分别进行PCR扩增,结果发现毒力基因平均携带量为16.4个,大部分Pm毒力因子检出率大于70%,包括与OMP相关的plpB、ompA、oma87和ompH;和黏附相关的ptfA、pfhA、tadD、hsf-1和fimA;与超氧化物歧化酶有关的sodC、sodA;和铁代谢相关的exbB、hgbB、exbD、hgbA、Fur和tonB,其中Fur检出率是100%,nanB携带率仅9.09%,而toxA和tbpA基因未被检测出。毒力基因分布和荚膜血清型存在一定的关联,pfhA和pmHAS在A型Pm中的检出率是100%,并且pmHAS只在A型菌中检测到;B型菌中多个基因的检出率是100%,包括影响细菌黏附作用的hsf-2和fimA,与OMP有关的ompH、plpB和oma87,和铁代谢有关的exbD、hgbB、tonB和Fur,还有sodC;而nanB只在D型菌中测出,A、B型均没有。致病性试验发现11株Pm对小鼠均有致病性,其中猪Pm-104组小鼠无死亡致病性最弱;禽Pm-A、Pm-B、Pm-C组小鼠6 h内全部死亡,这3株菌致病性最强。通过对Pm毒力基因与致病性的分析,发现毒力基因的携带量不是影响Pm致病性的主要因素,但ompA、hsf-1、pmHAS、hgbB、pfhA可增强Pm致病性,这对于进一步探索Pm致病性和疫苗的研发有一定的参考价值。
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