超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)是一类金属酶，它广泛存在于生物体内，能够催化生物体内超氧阴离子发生歧化反应，专一的清除生物体内多余的超氧阴离子，平衡生物体内的氧自由基。它可以防御氧毒性，增强机体抗辐射损伤能力，还可抗衰老，治疗一些疾病(如肿瘤，炎症及自身免疫疾病等等)。它在医药、食品、化妆品、及农业中有广泛的应用前景，其制备和应用广受人们的关注与重视。 本文研究从产SOD的乳酸菌、酵母菌菌株选育进而使用诱变等方法提高SOD产量，得到产SOD能力较高的酵母菌菌株Y7-20、乳酸菌菌株L16-10，对其培养条件进行优化，最终在3.7 L生物反应器中，对乳酸菌L16-10进行分批发酵产SOD初探，再对生成的SOD进行分离纯化。 首先，从自然界中筛选出乳酸菌50株，酵母菌620株，对其进行摇瓶发酵产SOD初筛，最终在节果皮表面筛选出一株酵母菌Y7，酵母菌摇床发酵产量最高为434.65 U/g，再通过紫外诱变和化学诱变，以及遗传稳定性实验，可得到一株遗传性状稳定的菌株Y7-20，在优化摇床发酵条件的情况下，最终可达1164.84U/g。同时，在乳酸菌中筛选出一株L16，在摇瓶条件下，SOD产量最高为3171.60U/g，再通过紫外诱变和化学诱变，获得高产菌侏L16-10，其SOD产量可达到3394.60 U/g，所以选择使用L16-10进行液体发酵初探。 其次，通过对L16-10和Y7-20培养基组成和摇瓶培养条件进行单因素试验，如培养基碳源、氮源、培养温度、pH值、摇床震荡速度等筛选影响SOD产量的主要因素。在单因素实验基础上，对发酵条件进行改良。获得乳酸菌L16-10适宜的培养条件为：乳糖为碳源，蛋白胨为氮源，pH6.5-7.0，摇床速度120 r/min，培养温度为38℃，在此条件下L16-10摇瓶发酵最终产量可达3522.69 U/g。 再次，在摇瓶发酵条件优化的基础上，在3.7 L生物反应器中进行分批发酵初探，对发酵罐发酵条件进行优化(接种量、通气量等)，结果表明：5.0％的接种量、100 L/h通气量适合SOD的发酵，在此条件下乳酸菌菌株L16-10产SOD的产量为124990 U/L。 最后，乳酸菌L16-10发酵湿菌体内SOD经分布纯化，DE-52离子交换柱层析后，酶总活力收率为26.9％，杂蛋白去除率为99.6％，最终得到纯化倍数67.32的3225.67 U/mg比活力的SOD蛋白。 此实验方法的优点在于可在一般条件的实验室内对生活里常见几种乳酸菌，酵母菌进行一般的高产SOD菌株的选育，并对其发酵条件做适当的改良。在整个实验过程中避免了使用太多的复杂仪器和对人身体有害的化学药品，使得实验方法简单实用，产品安全系数较高。