西唐氏链霉菌Z-L-22活性物质的分离提纯及理化性质初探

被引量 : 0次 | 上传用户:dage10
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
番茄溃疡病(Bacteria Canker of Tomato)是由密执安棒杆菌密执安亚种(Clavibacter michiganensis subp.michiganensis,Cmm)引起的一种重要的细菌病害,每年造成严重的经济损失,目前还没有安全有效的防治措施。本实验室从番茄植株根际土中筛选出一株对番茄溃疡病菌有强烈颉颃作用的链霉菌,通过生物学鉴定和分子检测把其确定为西唐氏链霉菌(S.setonii)。本实验主要从西唐氏链霉菌Z-L-22发酵抑菌活性物质的稳定性、理化性质、分离提纯方法等几个方面进行研究。在分离提纯之前,首先对其进行预处理,结果表明经过草酸处理的发酵抑菌活性物质会有少量损失,但能提高发酵液萃取分离效率。用HCl和NaOH调无菌发酵上清液的pH值,并在室温处理24h,60℃、90℃度条件下处理1h,结果表明抑菌活性物质的在强酸和中性条件下比较稳定,强碱条件下稳定性降低,并且温度升高会使其在酸碱中的稳定性降低;经过不同的温度处理,120℃处理12h其抑菌圈直径依然能达到21.4mm,说明该活性物质的高温稳定性比较高;抑菌活性物质的紫外线和日光稳定性实验表明它对紫外线和日光有较强的稳定性。用捷克八溶剂系统纸层析和pH纸层析法对西唐氏链霉菌Z-L-22的抑菌活性物质进行分析,发现活性物质在捷克八溶剂系统中的Rf值都在0.9以上,与经典的抗生素素色谱图对比发现其与大环内酯类抗生素的色谱图类似;在不同的pH条件下抑菌活性物质纸层析的Rf值相近,都接近溶剂前沿,这与中性抗生素的pH纸层析的色谱图相似,综上所述把西唐氏链霉菌Z-L-22的发酵活性物质初步确定为中性的大环内酯类抗生素。用不同的展开剂对发酵粗提物进行TLC分析,发现苯:乙酸乙酯:甲醇=19:19:4为最佳展开剂,能把发酵粗提物分为8个组分,通过TLC制备各个组分并对其进行抑菌生物活性测定,发现其中的四个具有抑菌生物活性,为别为Ⅰ(Rf=0.96)、Ⅱ(Rf=0.64)、Ⅲ(Rf=0.56)、Ⅳ(Rf=0.5)。对乙酸乙酯发酵液萃取和丙酮菌丝浸提粗提物进行HPLC分析,发现两者的组分相同,只是组分的含量不同。TLC分离的组分Ⅱ的纯度为85.58%,组分Ⅲ的纯度为78.65%。用非极性大孔吸附树脂吸附发酵粗提物中的活性物质,用40%、70%、90%的乙醇进行梯度洗脱,梯度洗脱组分的HPLC分析表明70%乙醇洗脱得到一个纯度为50.05%的活性组分,90%洗脱得到一个纯度为66.08%的活性组分。最后用半制备HPLC对发酵粗提物进行分离提纯,得到纯度在组分97%以上的Ⅱ、Ⅲ组分。
其他文献
目的:本临床研究旨在观察中药方剂“忘忧方”对抑郁症中医辨证属肝郁痰浊瘀血的治疗效果,并探讨其可能的作用机理。材料与方法:根据《中国精神障碍分类与诊断标准第三版》(CCMD-
本文在回顾了中国现代城市规划产生与发展历程的基础上,对中国在计划经济体制下的规划特点与西方国家市场经济下的规划进行了比较.针对当今中国经济发展起来越走向市场化的情况
知是行的前提,行是知的关键。文章指出改革开放是我们党在“知”上一次伟大觉醒,并具体阐述了改革开放分别是我们党的社会革命意识的伟大觉醒、我们党的自我革命意识的伟大觉
为查明S135钢级钻杆接头的耐磨带区域发生刺漏的原因,分析该接头的理化性能、宏观组织、裂纹金相组织以及断口形貌。分析结果表明:在堆焊接头耐磨带时,因热处理工艺不当,在耐
2007年10月~2008年4月对巴塘攀蜥Japalura batangensis冬眠进行初步研究。发现在模拟自然环境的圈养条件下,巴塘攀蜥主要选择在石缝、枯枝落叶等场所越冬。冬眠时间为当年11月
在Ba6-3xSm8+2xTi18O54系(x=2/3)微波介质陶瓷中,进行Pr/Sr协同置换Ba4Sm28/3Ti18O54陶瓷中的Sm/Ba,获得了具有钨青铜结构的固溶体结构.固定Pr的量时,随着Sr取代量的增加,介
双甘膦废水中含有高浓度总磷、有机磷、甲醛、氰化物、氨氮、COD,运用三效蒸发+强氧化+两级化学除磷+UASB+兼氧+好氧组合处理双甘膦废水。研究结果表明双甘膦废水排放满足《
阐述了武汉科技大学化学工程与技术学院对机械制图与化工制图课程进行整合的缘由,介绍了各部分内容的选取与整合。指出了教学过程中发现的问题,并给出了解决这些问题的对策。
土木工程活动是人类作用于自然生态环境最重要的生产活动之一。其中,工程材料的生产与使用、工程设计、工程施工、工程建成后的使用及报废后的拆除等过程均要消耗大量的能源,并
我国注册会计师行业从1980年恢复至今已有20多年的时间,注册会计师行业在社会公众的地位和作用越来越高,被人们誉为“经济警察”。然而,从证券市场的“老三案”到“新三案”,再到