【摘 要】
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目的：为了更好地模拟体内成骨微环境,建立一种安全的体外诱导干细胞定向诱导分化的新体系,SD大鼠骨髓间充质干细胞与包埋在海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-poly-lysine-
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目的：为了更好地模拟体内成骨微环境,建立一种安全的体外诱导干细胞定向诱导分化的新体系,SD大鼠骨髓间充质干细胞与包埋在海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-poly-lysine-alginate,APA)微胶囊中的SD大鼠成骨细胞进行体外共培养。方法：首先利用流式细胞仪分析了SD大鼠骨髓间充质干细胞的表型,然后进行了向成骨、脂肪多向诱导分化鉴定。第3代成骨细胞被包埋在直径400微米的APA微胶囊中,之后含有成骨细胞的微胶囊和外部的干细胞进行共培养,初始成骨细胞和干细胞的数量比约为10：1。共培养之后,通过碱性磷酸酶(ALP)以及von Kossa染色来评价骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化的程度。结果：实验结果表明骨髓间充质干细胞表达CD45-和CD29+,并具有向成骨和脂肪的多向分化能力。在体外微囊化共培养数周后,ALP定性和定量分析以及von Kossa染色证实微囊化成骨细胞能够体外促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化。结论：在微囊化共培养新体系中成骨细胞通过分泌一些重要的生长因子和细胞外基质作用于干细胞,从而模拟了体内干细胞向成骨细胞转化的微环境；微胶囊膜可以将成骨细胞和干细胞进行免疫隔离,从而避免了两者的混合,利于彻底分离外部的目的细胞。由此,本论文证实微胶囊是一种新型的共培养隔离新手段,微囊化共培养新体系将为骨组织工程中控制干细胞的体外定向分化提供一种工程化新思路。
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