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目的:异叶青兰是传统维吾尔药材,用于治疗高血压、慢性支气管炎等疾病。本研究通过制备异叶青兰粗提物,建立肾性高血压大鼠模型,证实异叶青兰的降压作用,并探索其可能的有效组分。制备异叶青兰总黄酮,观察其对高血压大鼠的血压和心肌肥厚的影响,并探讨其可能的分子机制,为开发和有效利用维吾尔地方药材提供理论依据。方法:①按1g:30ml的物料比加入70%乙醇,回流提取3 h,连续提取3次,获得异叶青兰粗提物。左肾动脉狭窄法建立两肾一夹高血压大鼠模型,设假手术组;模型组;异叶青兰粗提物低剂量组(DHBE-L)300m·kg-1·d-1、高剂量组(DHBE-H)600m·kg-1·d-1卡托普利组20n·kg-1·d-1,灌胃给药5周,每周无创尾套法测量大鼠尾动脉收缩压,5周后进行血流动力学指标检测、靶器官损伤评价,观察异叶青兰粗提物对高血压大鼠的影响。②对异叶青兰化学成分进行鉴别和检查,并制备乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物,进行离体血管张力实验和总黄酮含量的测定。③按lg:50ml的物料比加入70%乙醇,回流提取2h,连续提取3次,以AB-8大孔吸附树脂纯化法制备异叶青兰总黄酮,并测定其总黄酮含量。左肾动脉狭窄法建立两肾一夹高血压大鼠模型,设假手术组;模型组;异叶青兰总黄酮低剂量组(DHBF-L)300mg·kg-1·d-1、高剂量组(DHBF-H)600mg·kg-1·d1;卡托普利组 220mg·kg,灌胃给药6周,每周无创尾套法测量大鼠尾动脉收缩压,6周后进行血流动力学指标检测,超声心动图检查、靶器官损伤评价和心肌病理学检查,观察异叶青兰总黄酮对高血压大鼠的影响。④异叶青兰总黄酮降压及抑制心肌肥厚的机制从以下几个方面进行研究:对肾素血管紧张素醛固酮系统(RAAS)的影响:放免法测定心脏、肾脏组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血浆中醛固酮(ALD)的含量,Real-time PCR法测定左心组织中血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1a)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)mRNA的表达,Western blot法测定心肌组织中AT1、AT2的蛋白表达;对炎症因子的影响:放免法测定血中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)的含量;对血管内皮功能的影响:硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)的含量,放免法测定内皮素-1(ET-1)、6-酮-前列环素F1a(6-keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2),计算TXB2/6-keto-PGF1a的比值;对钙调神经磷酸酶通路的影响:Real-time PCR法测定左心组织中钙蛋白酶-Ⅰ(Calpain-Ⅰ)、钙调神经磷酸酶(CaN)mRNA的表达;对心脏重塑的影响:Real-time PCR法测定左心组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA的表达。结果:①异叶青兰粗提物对高血压大鼠的影响:与模型组相比,异叶青兰粗提物各给药组能够降低高血压大鼠的血压(P<0.01);降低颈动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、降低左室收缩压(LVSP)、左室舒张末期压(LVEDP),延长舒张时间(DD),降低左心室重/体重(LVW/BW)(P<0.01,P<0.05);②异叶青兰主要包含黄酮、挥发油、氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、驟质、有机酸、酚类、香豆素内酯类、萜类,可能含有皂苷,未检出蒽醌、生物碱、油脂。异叶青兰乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物均能舒张由氯化钾(KC1)引起的血管收缩,其IC50分别为0.055g·L-1和0.165 g.L-1,总黄酮含量分别为45.73%和17.82%。③异叶青兰总黄酮含量为57.97%。异叶青兰总黄酮对高血压大鼠的影响:与模型组相比,血流动力学结果显示:异叶青兰总黄酮高剂量组能降低SBP、LVSP、LVEDP、室内压最大上升速率(+dp/dtmax)(P<0.01,P<0.05);延长DD(P<0.05)。超声心动图结果显示:能减小室间隔舒张末期厚度(IVSd)、左心室后壁舒张末期厚度(LVPWd)、LVW/BW,升高左心室内径缩短率(FS)、射血分数(EF)(P<0.01,P<0.05)。组织学检查显示:DHBF-H组能减小LVW/BW,主动脉重量/长度(AW/lenth)(P<0.05)。病理学检查显示:异叶青兰两剂量组均能使高血压大鼠心肌细胞横截面积(CSA)明显减小(P<0.01),炎症细胞浸润减少,抑制心肌内血管中膜增厚,抑制心肌间质纤维化的发生。④对肾素血管紧张素醛固酮系统(RAAS)的影响:DHBF-H组能降低肾脏组织中AngⅡ(P<0.05),对心脏组织中AngⅡ的影响无显著性,降低心脏中AT1a mRNA的表达(P<0.05),对AT2 mRNA的影响无显著性,降低心脏中AT1的蛋白表达(P<0.05),对AT2蛋白表达的影响无显著性,能降低ALD水平(P<0.01);对炎症因子的影响:DHBF-H组能降低血中IL-1β、TNF-α(P<0.01),对IL-10的影响无显著性;对血管内皮功能的影响:DHBF-H组能升高NO,降低ET、降低TXB2/6-keto-PGF1a的比值(P<0.01,P<0.05);对钙调神经磷酸酶通路的影响:DHBF-H 组能降低 Calpain-I、CaN mRNA 的表达(P<0.01,P<0.05);对心脏重塑的影响:DHBF-H组能降低MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达,调节MMP-9/TIMP-1的平衡(P<0.01)。结论:异叶青兰含有黄酮类、挥发油类等物质;异叶青兰能够舒张由高浓度KC1引起的离体血管条收缩;异叶青兰总黄酮对高血压大鼠具有降压作用,可能是通过①降低高血压大鼠肾脏的血管紧张素Ⅱ的含量,降低醛固酮的水平,抑制其缩血管、水钠潴留、抗利尿作用,抑制血管平滑肌增殖。②调节ET/NO,调节TXA2/PGI2的平衡,降低TNF-α和IL-1β,从而保护内皮功能,抑制血管重构;异叶青兰总黄酮能够抑制高血压大鼠心肌肥厚,可能是通过①降低高血压大鼠心脏中的AT1a的mRNA和蛋白表达;②降低高血压大鼠ALD的水平;③降低高血压大鼠TNF-α、IL-1β的水平。这些刺激因素的降低一方面抑制高血压大鼠Calpain、CaN的mRNA表达,抑制心肌细胞肥大;另一方面调节高血压大鼠的MMP-9/TIMP-1的平衡,抑制心肌外基质重构的发生,其抑制CaN通路还可能与其升高NO,抑制L-型Ca2+通道有关。