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植物组织培养的应用越来越广泛,但是需要长期保持无菌环境,对技术人员要求严格,高压灭菌时间长,消耗能源较大,成本相对较高。开放式组织培养不需要高压灭菌,不使用超净工作台,在脱离无菌的自然环境中操作,可以简化操作步骤,节约能源,降低生产成本。本研究以夏波蒂马铃薯组培苗为材料,改变组织培养的培养基配制方式和接种方式。初步筛选次氯酸钠浸泡组培容器消毒浓度,筛选培养基中添加抑菌剂浓度、琼脂浓度和蔗糖浓度;对次氯酸钠浸泡浓度,培养基中添加的抑菌剂浓度、琼脂浓度和蔗糖浓度进行响应面优化;以接种室的普通工作台代替超净工作台,对比不同的接种方式、不同接种部位的马铃薯组培苗的影响,找到适宜的接种方式与接种部位;对比接种室与超净工作台的洁净度;对比开放式组织培养与传统组织培养成本,以期对开放式组织培养的实际应用起到指导作用。主要结果如下:1.用于组培容器浸泡消毒的次氯酸钠浓度在2%及以上时不发生污染,但是会发生白化现象,在次氯酸钠浓度为1.5%时,开放式接种方式下的组培苗污染率降低到10%,生长状况较好;开放式组织培养培养基中抑菌剂益培隆添加浓度为0.8ml/L时组培苗污染率为0;在蔗糖浓度为7.5g/L时,开放式接种条件下培养组培苗生长指标较好,污染率为10%;开放式组织培养培养基中琼脂浓度为8g/L时污染率为0,组培苗生长正常,且便于操作;开放式接种与传统接种两种接种方式对植株的生长指标与光合指标影响无差异,开放式接种操作简便,节约成本,在响应面优化设计研究中采用开放式接种。2.对4个因素进行响应面优化设计,得到马铃薯开放式组织培养优化培养基为:次氯酸钠浸泡消毒浓度1%+益培隆浓度0.5ml/L+蔗糖浓度7.5g/L+琼脂浓度6.6g/L,4个因素对夏波蒂马铃薯组培苗的有效生长率的影响显著性从大到小为:次氯酸钠、蔗糖、益培隆、琼脂。3.开放式接种室5个工作台洁净度均达到3万级,在实际接种过程中开放式接种后培养的植株生长状况良好,污染率可控制在5%以下,具有实际意义;传统组织培养配制100L培养基接种组培苗培养28天费用总计805.39元,约为开放式组织培养费用426.06元的2倍;传统组织培养的灭菌费用312.73元约为开放式组织培养12.16元的26倍;传统组织培养的接种费用83.11元约为开放式组织培养接种费用36.59元的2.3倍。