【摘 要】
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【目的】建立和优化金铁锁SSR-PCR反应体系。【方法】以金铁锁嫩叶为试验材料,采用Ezup柱式植物基因组DNA抽提试剂盒、SDS法和CTAB法提取金铁锁DNA,并对提取结果进行比较。利
【机 构】
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西南林业大学,西南林业大学,毕节市中药研究所,毕节市林业科学研究所,云南农业大学
【基金项目】
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贵州省科技计划项目(黔科合SY字[2015]3027);云南省教育厅科学研究基金项目(2016ZZX52);西南林业大学科研基金项目(XL21611)
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【目的】建立和优化金铁锁SSR-PCR反应体系。【方法】以金铁锁嫩叶为试验材料,采用Ezup柱式植物基因组DNA抽提试剂盒、SDS法和CTAB法提取金铁锁DNA,并对提取结果进行比较。利用初筛并合成的20对金铁锁EST-SSR引物,对影响SSR-PCR体系的模板DNA、引物、Taq DNA聚合酶和dNTP用量这4个因素进行L16(4^4)正交实验,从而建立较为稳定的金铁锁SSR-PCR反应体系。【结果】试剂盒法提取得到的金铁锁DNA质量最好且符合SSR分子标记试验;在20对金铁锁EST-SSR引物中,有2
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