【摘 要】
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目的:研究M2型巨噬细胞对放射后的BMSCs向肌成纤维细胞转化的抑制作用。方法:分别培养SD大鼠来源的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)以及由巨噬细胞极化而来的M2型巨噬细胞,通过流式细胞术鉴定其表面标志物。首先建立BMSCs体外细胞辐照模型,然后依据本模型将照射后的BMSCs随机分为三组进行研究:组1,照射后的BMSCs+M2型巨
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目的:研究M2型巨噬细胞对放射后的BMSCs向肌成纤维细胞转化的抑制作用。方法:分别培养SD大鼠来源的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)以及由巨噬细胞极化而来的M2型巨噬细胞,通过流式细胞术鉴定其表面标志物。首先建立BMSCs体外细胞辐照模型,然后依据本模型将照射后的BMSCs随机分为三组进行研究:组1,照射后的BMSCs+M2型巨噬细胞Transwell小室(3μm)共培养;组2,照射后的BMSCs+M2型巨噬细胞Transwell小室(8μm)共培养;组3,BMSCs单纯照射组。在相应时间节点对各组BMSCs分别进行光镜下的细胞形态学观察,CCK-8法细胞增殖能力检测,活细胞筛选检测,并利用western blot检测各组BMSCs内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、NADPH氧化酶(NOX4)、骨形成蛋白2(BMP-2)的表达水平。结果:SD大鼠骨髓间充质干细胞培养基中加入M-CSF(巨噬细胞集落刺激因子)30 ng/ml培养6-9 d后可获得成熟的巨噬细胞;应用20 ng/ml IL-4(白介素4)24 h后可诱导成熟的巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞;照射后的BMSCs与M2型巨噬细胞用Transwell小室(8μm)共培养48 h后,BMSCs中α-SMA和NOX4的表达水平明显降低,BMP-2的表达水平有所增加(P<0.05)。结论:M2型巨噬细胞可以减少放射后的BMSCs中α-SMA、NOX4的生成并促进BMP-2的表达,抑制放射后的BMSCs向肌成纤维细胞的转化,可能对放射性颌骨骨坏死具有一定的治疗作用。
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