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研究目的：本研究通过观察急性缺血性脑卒中(IS)患者血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63表达的变化,研究血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63与急性IS的相关性,探讨应用血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63监测血小板的活化状态和预测急性IS发病的可能性；并通过检测急性IS患者血小板聚集率及血小板膜GPⅡb HPA-3基因多态性,探讨其与血小板膜糖蛋白表达及与阿司匹林抵抗(AR)的相关性,以期对急性IS患者提供抗血小板治疗的依据。方法：1、急性IS患者226例,对照组100例,对照组分为正常对照组40例及高危对照组60例,高危对照组为合并卒中危险因素如高血压、糖尿病、冠心病等危险因素者,所有受试者均常规检测血常规、凝血常规、肝功能、血脂、血糖等生化指标,病例组入院后立即用美国国立卫生院神经功能缺损(NIHSS)评分对其进行神经功能测评,按评分结果分为轻、中、重3个亚组。根据患者48小时内病情是否加重分为进展性IS及稳定型IS。2、采用流式细胞仪(FCM)检测病例组及对照组血小板膜糖蛋白PAC-1、 CD62p、CD63的表达,并分别以二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)做诱导剂,用流式细胞仪检测以上两组患者的血小板聚集率。并应用聚合酶链反应-限制性酶切片断长度多态性分析方法检测病例组及对照组血小板膜GP IIbHPA-3基因多态性。3、其中病例组111例患者予阿司匹林肠溶片100mg/d干预治疗7d后复查血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63的表达及血小板聚集率。4、观察病例组不同NIHSS分组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63的表达及血小板聚集率。5、观察进展性IS与稳定型IS患者血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63的表达及血小板聚集率。6、探讨血小板膜GPⅡb HPA-3基因多态性与血小板膜糖蛋白PAC-1、 CD62p、CD63表达的相关性。7、根据阿司匹林干预治疗后检测的血小板聚集率水平,筛查AR患者(根据本实验研究结果,由ADP做诱导剂所测得的血小板聚集率>51.35%；由AA做诱导剂所测得的血小板聚集率>47.63%,满足上述两项者定义为AR),并探讨AR者与血小板膜GPⅡbHPA-3基因多态性的相关性。结果：1、病例组、高危对照组与正常对照组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p.CD63表达水平的比较：病例组血小板膜糖蛋白PAC-1(30.26±15.56%)表达水平高于正常对照组(24.22±10.86%,P<0.05)。病例组血小板膜糖蛋白CD62p(16.28±7.41%)表达水平高于正常对照组(13.35±5.86%,P<0.05)；高危对照组CD62p(16.59±6.55%)表达水平高于正常对照组(P<0.05)。病例组血小板膜糖蛋白CD63(20.79±9.64%)表达水平高于高危对照组(16.34±6.74%)及正常对照组(13.35±5.86%),均有统计学差异(P<0.05)。2、以ADP做诱导剂检测血小板聚集率,病例组(31.30±12.78%)及高危对照组(31.25±11.09%)血小板聚集率水平均高于正常对照组(23.80±10.86%),差异有统计学意义(P<0.05),病例组与高危对照组之间无统计学差异。以AA做诱导剂检测血小板聚集率,病例组(30.56±12.77%)血小板聚集率水平高于高危对照组(26.45±11.09%)及正常对照组(23.80±11.86%),且高危对照组血小板聚集率水平高于正常对照组,均有统计学差异(P<0.05)。3、病例组不同NIHSS分组血小板膜糖蛋白PAC-1表达无显著性差异,F值1.390,P=0.251；CD62p表达无显著性差异,F值0.06,P=0.994；CD63表达无显著性差异,F值2.132,P＝0.121；由ADP做诱导剂测得的血小板聚集率无显著性差异,F值1.431,P=0.241；由AA做诱导剂测得的血小板聚集率无显著性差异,F值1.140,P=0.322。4、阿司匹林干预治疗后血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63的表达及血小板聚集率水平较干预前明显下降,干预前PAC-1、CD62p、CD63及由ADP、 AA诱导的血小板聚集率分别为：30.07±15.61%、16.41±7.45%、20.80±9.67%、31.16±12.80%、30.48±12.84%；干预后PAC-1、CD62p.CD63及由ADP、AA诱导的血小板聚集率分别为：21.63±12.80%、9.42±7.00%、14.92±10.35%、24.65±12.09%、20.23±13.24%；差异有统计学意义(P<0.05)。5、稳定型较进展性IS患者血小板膜糖蛋白PAC-1(29.09±14.64%vs37.43±18.19%)、CD62p(15.56±7.27%vs20.16±7.24%)表达水平低,差异有统计学意义(P<0.05)。6、本研究发现AR者6人,阿司匹林敏感(AS)者105人,AR发生率约为5.4%。AR组与AS组血小板膜糖蛋白PAC-1(49.56±14.12%vs28.95±15.00%).CD62p(24.73±7.19%vs15.84±7.18%).CD63(33.58±9.16%vs20.07±9.21％)表达水平比较,AR组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p、CD63表达水平显著高于AS组,差异有统计学意义(P<0.05)。7、血小板膜GP Ⅱb HPA-3aa、ab、bb3种基因型PAC-1表达率分别为：27.55±16.97%、30.99±15.34%、32.86±13.06%；3种基因型CD62p表达率分别为：16.77±7.93%、15.92±7.41%、32.86±13.06%；bb基因型PAC-1.CD62p表达的均值高于aa基因型及ab基因型,但无统计学差异,是否bb基因型者发生IS后可能更易导致血小板膜糖蛋白的高表达,有待进一步研究。8、病例组发生AR者中血小板膜GPⅡb HPA-3bb基因型频率较aa、ab基因型高,差异有统计学意义(P=0.041),提示血小板膜GPⅡb HPA-3bb基因型可能与阿司匹林抵抗相关。结论：1、急性IS患者血小板高度活化,应用FCM检测血小板膜糖蛋白PAC-1、 CD62p、CD63的表达可以作为检测血小板活化程度的敏感指标。2、进展性较稳定型IS患者血小板活化程度高,提示是否血小板膜糖蛋白表达增高显著的IS患者发展为进展性IS的可能性大。3、高危对照组血小板膜糖蛋白的表达及聚集率高于健康人,提示存在卒中危险因素如高血压、冠心病、糖尿病者血小板处于活化状态,应严格控制卒中的危险因素,减少血小板膜糖蛋白的表达及血小板聚集率,以降低脑卒中及血栓事件的发生率。4、阿司匹林可以减少血小板表面膜糖蛋白的表达及血小板聚集率,抑制血小板的活化。5.GPⅡb HPA-3三种基因型血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62p及CD63的表达无显著性差异,但bb基因型PAC-1、CD62p表达的均值高于aa基因型及ab基因型,是否IS bb基因型携带者更易引起血小板活化,有待进一步研究。6、IS患者存在AR现象,本研究中AR患者占5.4%,AR患者服用阿司匹林后不能有效抑制血小板聚集,其膜糖蛋白仍高表达,且与血小板膜GPⅡbHPA-3bb基因型相关,提示血小板膜GPⅡb HPA-3bb基因型可能为AR的独立危险因子。