随着大剂量免疫抑制剂、化疗药物以及广谱抗生素的应用,侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的发病率及死亡率在全球范围内迅速上升。因为缺乏特异性临床症状和快速有效的诊断方法(血液真菌分离培养敏感性很低),目前IC的诊断仍困难。因此,迫切需要研究发展敏感性强、特异性高、操作简便的非培养诊断方法来改善侵袭性念珠菌病的病原学诊断。　　 目的　　 通过IC家兔模型,考察免疫功能正常和免疫功能降低的实验动物产生特异性抗体的动力学,探索检测抗烯醇化酶抗体在侵袭性念珠菌病早期诊断中的价值；利用重组白念珠菌烯醇化酶抗原,建立测定人血清中抗白念珠菌烯醇化酶IgG抗体的ELISA法,评估该法在侵袭性念珠菌病(IC)诊断中的应用价值。　　 方法　　 将新西兰大白兔随机分为A组(免疫功能正常组)和B组(免疫功能低下组,注射氢化可的松造模),静脉注射白念珠菌分生孢子,建立IC动物模型；每2天采动物血一次,用经Con A Sepharose4B亲和层析柱纯化的白念珠菌非糖基化蛋白进行western blot,检测兔血清抗体谱；用纯化的重组烯醇化酶蛋白进行ELISA,检测兔抗烯醇化酶抗体滴度。收集经血培养确诊的各类侵袭性念珠菌患者血清,以及其他标本培养确诊的定植感染者血清,用重组白念珠菌烯醇化酶作包被抗原,用ELISA法测定血清中的相应抗体,确定cut off值并对方法的精密度和特异性进行考察。　　 结果　　 (1)western blot结果证实,感染的家兔可产生多种白念珠菌非糖基化蛋白特异性抗体,烯醇化酶抗体出现较早且条带清晰。另外,western blot也证实用重组烯醇化酶可以检测到相应抗体。　　 (2)ELISA结果显示,两组实验兔从感染后第12d起,都可以检测到血清抗烯醇化酶抗体。两组抗体滴度未见明显差异,且随着时间增加,抗体滴度上升,在20～24天,滴度均达到8000。　　 (3)以重组烯醇化酶抗原建立的ELISA法精密度良好,批内CV=5.6％,批间CV=14.6％；阻断率=93.0％,证实此法对抗白念珠菌烯醇化酶抗体具有特异性。依据ROC曲线,选择吸光度(A)值0.370作为cut-off值。IC患者阳性率为77.3％(51／66),健康人阳性率为2.0％(4／200),二者差异有统计学意义(P<0.05)；念珠菌定植感染者阳性率为31.3％(10／32),与IC患者阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。IC患者中47.0％(31／66)可以在血培养阳性前检测到抗烯醇化酶抗体。　　 结论　　 免疫功能正常和免疫功能低下实验家兔罹患IC时,产生特异性抗体的动力学无显著差别；重组烯醇化酶可以作为抗原检测感染动物以及患者血清相应抗体；用重组烯醇化酶建立的检测抗白念珠菌烯醇化酶抗体的ELISA法,在IC早期诊断中具有潜在应用价值。早期诊断