目前我国对海洋环境中重金属污染的监测仍然是以化学分析为主，化学分析方法虽然能对环境或生物体内重金属含量进行精确的定量，但无法反映污染物的生物效应，也难以了解污染物对海洋生态系统造成的破坏程度，很难评估其潜在毒性。因此筛选出与环境污染物相关性好的分子生物标志物，并建立特异性强、微量鉴定、费用低廉的快速检测方法具有良好的应用前景和效益。　　 本研究以灵敏度高、特异性强的海洋重金属污染生物标志物—MT为指标，克隆了褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)的MT基因序列，建立并优化了针对MT的LAMP技术。为验证该方法的可行性，将褐菖鲉分别曝露于1.6μg·L-1、8.0μg·L-1、40μg·L-1、200μg·L-1、500μg·L-1的Cd和Pb7d后，利用LAMP技术和Realtime-PCR技术定量测定肝脏MT mRNA表达量，对比验证两者结果。同时利用LAMP技术对污染后HSPs(HSP60、HSC70、HSP70、HSP90)基因的表达量进行检测，分析Cd和Pb与HSPs各亚型的剂量-效应关系，筛选出重金属污染的早期预测指标。主要研究结果如下:　　 (1)建立并优化了褐菖鲉MT的LAMP检测技术，结果表明，外引物与内引物浓度比为1∶6时扩增效果最好，最佳Mg2+浓度为6 mmol·L-1，甜菜碱最佳浓度为0.4 mol·L-1，最佳dNTP浓度为1.4 mmol·L-1，最适反应温度为64℃，最佳反应时间为60 min。　　 (2) Cd、Pb污染实验表明，利用LAMP技术定量测定褐菖鲉肝脏MT表达量与Real-time PCR检测结果有高度的一致性，证实了LAMP技术应用于重金属污染样品检测的可行性。且LAMP技术具有反应速度快、设备简单、结果易于鉴定等Real-time PCR无法比拟的优势，更适合作为海洋重金属污染的现场监测方法。　　 (3)褐菖鲉肝脏MT对不同浓度Cd和Pb污染的响应趋势大不相同。MT对Cd污染较敏感，在8.0μg·L-1浓度组被强烈诱导且mRNA表达量达到最大值，为对照组的12.27倍，其余各浓度组与对照组无显著性差异，表明MT可以作为Cd污染早期预测指标。MT对Pb污染较不敏感，40μg·L-1浓度组之前随浓度的增加mRNA表达量逐渐下降，而后逐渐上升，在500μg·L-1组达到最大值，但所有浓度组与对照组均无显著性差异。　　 (4)采取LAMP技术检测Cd与Pb污染后HSPs的表达量表明，HSPs对单一重金属的不同浓度以及不同重金属的响应趋势各异，总体对Cd比Pb敏感。对Cd污染早期就比较敏感的基因有HSC70和HSP70，较低浓度组诱导下HSC70和HSP70的表达量均上升，HSP70上升显著，为对照组的54.07倍;HSP60和HSP90在低浓度诱导下上升不显著或被抑制，在污染高浓度组表达量上升，分别在8.0μg·L-1和40μg·L-1达到最大值。对Pb污染早期比较敏感的基因为HSC70和HSP90，在1.6μg·L-1浓度组，这两种基因的表达量均被诱导，HSP90上升显著(P=0.003)，为对照组的4.7倍，在小于500μg·L-1组中，Pb对HSPs基因表达量的诱导或者抑制均不显著，在500μg·L-1被显著诱导的蛋白有HSP90(P=0.004)和HSP70(P=0.013)，分别为对照组的4.27和4.69倍。