硫氧还蛋白基因（thioredoxin,Trx）是Nrf2/ARE抗氧化通路下游靶基因之一,在保护核酸、抵抗氧化应激、控制细胞凋亡方面有着重要的作用。Nrf2/ARE通路应对氧化应激时,先由核转录因子Nrf2与小Maf蛋白结合,再识别基因启动子区上抗氧化元件（ARE）,从而调节基因表达。本文研究了褶纹冠蚌Nrf2在微囊毒素刺激下调控Trx表达的机制。构建pGBKT7-Nrf2载体,重组质粒转到Y2HGold酵母菌中检测其自激活和毒性作用。结果显示p GBKT7-Nrf2重组质粒可以在含有X-α-gal显色剂和Ab A抗生素的缺陷型培养基上长出蓝色菌斑,并且其菌斑形态、大小及其数量与含有p GBKT7空载的菌斑相似,这表明Nrf2全长具有自激活作用,且对酵母菌无毒性作用。经Nrf2-ORF序列分段缺失验证,自激活结构域存在于Nrf2开放阅读框的1038-1560 bp范围内。在微囊藻毒素（MC）胁迫下,利用实时荧光定量PCR检测分析褶纹冠蚌硫氧还蛋白（Cp Trx）基因的表达量变化。Cp Trx m RNA表达量在鳃和肾脏组织中呈现显著性上调。利用特异性小RNA分别对Nrf2基因和Keap1基因进行敲降,在MC胁迫下,与对照组相比,Keap1基因敲降组中Cp Trx m RNA表达量在鳃和肾脏组织中均有显著性上调。相反,Nrf2基因敲降组的Cp Trx m RNA表达量则表现为显著性下调。以褶纹冠蚌DNA为模板,利用染色体步移法扩增得到Cp Trx基因启动子DNA序列（2423 bp）。经在线数据库分析显示,启动子区上可能存在着多种转录因子结合位点以及顺式元件,其中包括TATA盒子、CAAT盒子、ARE（抗氧化应激元件）、AP-1与核因子NF-k B的结合位点等。双荧光素酶报告显示CpTrx基因启动子具有较高的转录活性,并且转录活性在ARE元件突变后仍然存在。启动子-206～+217 bp的区域为核心启动子区,可能存在正向调控元件。MC不能上调Cp Trx基因启动子的活性,Cp Nrf2基因也对Cp Trx基因启动子活性具有抑制作用。凝胶阻滞实验显示,CpTrx基因启动子能够与纯化蛋白Cp Nrf2和Cp Maf K在体外结合。启动子区上ARE元件突变后,这种结合现象消失。