聚对苯二甲酸乙二酯（PET）是通用的高分子材料之一，广泛应用于各个领域。为了对PET进行减量处理和表面改性及能有效地处理PET废弃物，人们开始了对PET降解菌及微生物对PET降解性能的研究。而由于PET具有疏水性而且结构致密，现有的菌种都不能对其进行生物降解，所以只能通过人工培养，筛选出PET的高效降解菌。 因为对苯二甲酸二乙酯（DTP）与PET的基本单元结构上相似，因此本实验以DTP为模拟物来培养和驯化PET的降解菌，并对其降解性能进行研究。另外，作为一种化学试剂DTP本身也是一种环境荷尔蒙，对生物体内分泌系统有扰乱和破坏作用。 本课题从对DTP有降解作用的混合菌悬液中分离出5株纯种菌，并从中筛选出对DTP降解作用最好的菌株F₄。经革兰氏染色试验判定菌株F₄为革兰氏阳性菌，经氧化酶和过氧化氢酶试验判定菌株F₄为好氧菌。 我们对菌株F₄的生长特性进行了试验。结果表明在培养基M₅中菌株F₄的生长情况最好，远远好于培养基M₁，M₂和M₃中的生长。DTP浓度对菌株F₄的生长速率和生长总量均有影响，DTP的浓度越高，菌体的总量就越大；在较高DTP浓度下菌株F₄的生长速率也大于在低浓度下的生长速率。另外，作为代谢产物的对苯二甲酸对菌株F₄的生长有一定的抑制作用。菌株F₄的最佳生长温度是30℃，最佳pH值为7.5，并且菌株F₄在振荡情况下的生长情况要好于静止条件下培养的。 本课题还对菌株F₄降解DTP的影响因素及其动力学进行了分析。菌株F₄降解DTP的最适温度为30℃；最适pH值为7.5；菌株F₄对DTP的降解适合于振荡培养，且振荡速率越高降解效果越好；随降解液中接种量的增加，DTP的降解率也增大。菌株F₄对DTP的降解符合一级动力学特征。 为了对DTP及PET纤维的生物降解进行深入探讨，我们提取了菌株F₄的胞外和胞内酶的粗酶液，并进行研究。初步认定菌株F₄的DTP降解酶主要定域于胞内。提取酶E_内对DTP的催化降解反应的米氏常数K_m为0.626g／L，即3.8×天津工业大学硕士研究生学位论文10一3mol/L。提取酶E。对DTP降解的最适pH值为7一8，最适合的温度为30℃左右。 为与提取酶进行比较，本课题还用Sigma公司的脂肪酶进行与提取酶同样的试验。Sigma脂肪酶对DTP的催化降解反应的米氏常数长。为7.82留L，即4.7X10一Zmol/L;最适pH值为7一8，最适合的温度为30℃左右。由Km可知，提取酶E}。对DTP的亲和力大于Sigma脂肪酶，它更适合于DTP的降解。 本课题分别用Sigma脂肪酶、菌株F4及其提取酶对PET纤维进行了降解实验。菌株F4对PET纤维确有降解作用。Sigma脂肪酶对PET纤维的降解作用十分微弱。单纯用提取酶E外和E内对PET纤维进行降解，基本上都没有什么效果;而提取酶E外和E内的混合物对PET纤维则有一定的降解效果。提取酶的混合物对PET纤维的降解效果比菌株F4的降解效果好许多。 尽管对PET纤维的生物降解效果还不是很理想，但目前的研究成果为今后的进一步研究奠定了基础。