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目的:通过动物实验观察外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)移植及重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)动员骨髓干细胞对兔心肌梗死后心功能及梗死区周边血管新生的影响。方法:以5月龄健康大耳兔为研究对象。将实验动物随机分为3组,每组15只。组Ⅰ为急性心肌梗死对照组,组Ⅱ为PBMCs移植治疗组,组Ⅲ为rhG-CSF动员治疗组。组Ⅰ在结扎左冠状动脉前降支造成心肌梗死后不予以任何治疗;组Ⅱ经Ficoll密度梯度离心法分离PBMCs,与Brdu共培养48 h以标记细胞核,在心肌梗死模型制备成功后30 min给予PBMCs移植治疗;组Ⅲ在心肌梗死后给予rhG-CSF 30μg·kg-1·d-1皮下注射,共5天。于术前及术后1周、6周末采用超声心动图测定左心室舒张末内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDd)及左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)。所有兔在心肌梗死6周后处死,取心脏做病理切片。采用HE(苏木素-伊红)染色测量心肌梗死面积。免疫组织化学法观察组Ⅱ移植细胞在梗死区的生长和分化情况及3组实验动物梗死区周边新生毛细血管密度。结果:1、组Ⅱ经Ficoll密度梯度离心法成功从外周血分离到形态较一致的圆形单个核细胞。2、术前超声心动图显示:组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ兔LVEDd分别为12.98±1.38 mm、12.72±1.04 mm、12.94±1.37 mm,LVEF分别为79.84±3.55%、79.80±3.59%、80.31±3.64%,各组之间差别无统计学意义(P>0.05)。术后第1周末超声心动图显示:组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ兔LVEDd分别为17.77±1.59 mm、16.87±1.28 mm、17.02±1.64 mm,LVEF分别为50.98±6.78%、52.14±5.61%、53.72±4.91%。3组实验动物心梗后1周LVEF与术前比较均显著下降(P<0.01)。术后第6周末超声心动图显示:组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ兔LVEDd分别为17.71±1.64 mm、16.03±0.94 mm、15.97±1.52 mm,LVEF分别为50.89±8.32%、57.54±5.60%、56.43±5.77%。与急性心肌梗死对照组相比,PBMCs移植和rhG-CSF动员均能缩短LVEDd(P<0.01)、提高LVEF(P<0.05),而两个治疗组之间无统计学差异(P>0.05)。3、HE染色显示:组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ兔的心肌梗死面积分别为37.15±2.94%、26.87±2.33%、27.47±2.13%,与急性心肌梗死对照组相比,PBMCs移植和rhG-CSF动员均能缩小梗死面积(P<0.01)。4、鼠抗Brdu单克隆抗体染色显示:组Ⅱ在细胞移植术后6周可看到坏死的心肌组织内存在Brdu标记阳性的移植细胞。主要位于局部注射部位,呈局灶状无序生长,细胞核棕染,形态与正常心肌细胞有差异。5、鼠抗Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体染色显示:组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅲ兔梗死中心区新生毛细血管密度(条/HP)分别为2.54±1.27、8.40±1.96、6.20±1.26,梗死边缘区新生毛细血管密度分别为13.69±2.93、25.33±3.75、22.87±2.70,与急性心肌梗死对照组相比,PBMCs移植和rhG-CSF皮下注射均能增加梗死区周边新生毛细血管数(P<0.01),且PBMCs移植较rhG-CSF动员治疗效果更好。结论:1、本研究通过开胸结扎左冠状动脉前降支成功建立了兔急性心肌梗死模型。2、PBMCs移植和rhG-CSF动员骨髓干细胞均能促进血管再生、减少心肌梗死面积、改善心肌梗死后的心室重构,提高心功能。