新疆阿魏抗癌、抗氧化、调脂的有效部位筛选及其相关成分含量测定

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sww0310818
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目的:研究新疆阿魏不同极性分离部位抗癌、抗氧化、调脂的药效及其主要有效成分含量,筛选最优有效部位。  方法:1.通过不同极性溶剂和硅藻土的吸附特性分离新疆阿魏的不同极性部位。2.通过磺酰罗丹明B比色法(SRB)检测新疆阿魏不同分离部位对结肠癌细胞HCT116、肝癌细胞HepG2、胃癌细胞MFC、结肠腺癌细胞Caco-2药物作用24小时后的增殖抑制作用3.通过流式细胞术检测新疆阿魏不同分离部位对结肠癌细胞HCT116、肝癌细胞HepG2、结肠腺癌细胞CACO-2药物作用24小时后的促凋亡作用。4.通过DPPH自由基法,并以IC50值作为清除DPPH自由基能力的指标,评价和筛选新疆阿魏各极性部位自身抗氧化能力的优劣.5.通过 SOD酶反应法,分析阿魏各部位对HepG2细胞胞内SOD酶的活性影响。6.通过检测阿魏各极性部位对 HepG2肝细胞内总胆固醇影响,筛选调脂有效部位。7.通过检测新疆阿魏各极性部位对脂肪酶的抑制作用和对诱导非酒精性脂肪肝模型HepG2细胞胞内甘油三酯的影响,筛选调脂有效部位。8.以新疆阿魏不同极性部位为研究对象,以阿魏酸、法尼斯淝醇A、法尼斯淝醇C为标准品,建立阿魏高效液相色谱图谱,分析研究各部位特征成分含量。  结果:1.新疆阿魏按极性分出性状不一的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇四个部位,以石油醚部位、乙酸乙酯部位所占比重最高分别为0.12g/g和0.15 g/g。2.新疆阿魏各极性部位对HCT116、Caco-2、HepG2、MFC细胞的增殖均有一定抑制作用,新疆阿魏各极性部位对 HCT116细胞增殖抑制较弱,新疆阿魏乙酸乙酯部位对Caco-2、HepG2、MFC细胞的抑制效果比较明显,其中对MFC细胞的抑制效果最好IC50为9.0 mg·L-1,而石油醚部抑制最弱,低浓度下还具有营养肿瘤细胞的作用。3.新疆阿魏各极性部位均对HCT116、Caco-2、HepG2细胞三种肿瘤细胞有一定的促进凋亡作用,在促结肠癌 HCT116的凋亡作用研究中发现阿魏乙酸乙酯部位效果最好总凋亡率为(56.2?0.9)%,促 Caco-2凋亡作用研究中发现正丁醇部、甲醇部效果最好分别为正丁醇部为(80.0±11.5)%,甲醇部为(76.3±12.1)%,促 HepG2凋亡作用中乙酸乙酯部位、正丁醇部效果最好总凋亡率分别为(80.8±11.6)%、(73.4±4.6)%。4.新疆阿魏不同极性部位除石油醚部位外,均对DPPH自由基有清除作用,其中乙酸乙酯部、正丁醇效果最好IC50分别为(34.1±2.4)mg·L-1和(33.8±1.6)mg·L-1。5.阿魏各极性分离部位在7.5mg·L-1浓度下对 HepG2细胞胞内SOD活性无影响。6.阿魏石油醚部对HepG2胞内总胆固醇无影响;乙酸乙酯部、正丁醇部、甲醇部高中低均能降低胞内胆固醇。7.阿魏各极性部位对脂肪酶的抑制率很低,远远低于阳性药。阿魏石油醚部对HepG2胞内甘油三酯无影响。在高浓度下正丁醇部具有降低胞内甘油三酯作用,中等浓度下三个部位均能有效降低胞内甘油三酯,但组间比较无差异。低浓度下只有乙酸乙酯部有较好的降低胞内甘油三酯的作用。8.HPLC检测结果显示石油醚部成分均未检出,与其他三个部位差异较大,乙酸乙酯部、正丁醇部、甲醇部成分结构相似,成分含量不同。阿魏酸含量在乙酸乙酯部、正丁醇部、甲醇部分别为(33.4±0.3)、(76.5±1.4)、(72.3±0.6)mg·g-1,法尼斯淝醇A含量分别为(84.6±0.5)、(86.7±0.8)、(82.6±0.3)mg·g-1,法尼斯淝醇C含量分别为(69.5±1.6)、(71.4±1.3)、(66.3±0.9) mg·g-1。  结论:新疆阿魏乙酸乙酯部位为抗肿瘤、抗氧化、调脂效果最优有效部位。
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