聚多巴胺表面分子印迹纳米微球的制备及在药物递送中的应用

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多巴胺(DA)兼有儿茶酚基团和氨基,因此常作为贻贝粘附蛋白的模拟物。本研究发现多巴胺不仅能通过氧化自聚合在基体材料表面形成聚多巴胺涂层,而且能够在乙醇/氨水混合液中形成聚多巴胺纳米微球(PDA NPs)。为了得到尺寸均匀、粒径稳定可控的PDA NPs,本论文研究谈论了反应介质、溶液pH值、反应时间、多巴胺浓度等制备因素对聚多巴胺纳米微球粒径和形貌的影响。同时,研究了粒径形貌对PDA NPs生物相容性的影响。基于以上研究,我们尝试着在制得的尺寸均匀,分散性良好的聚多巴胺纳米微球的表面进行模型药物的分子印迹反应,以达到对模型药物的控释缓释效果。此外,还研究了聚多巴胺纳米微球表面印迹层厚度对载药的影响。并将该药物载体与之前研究的聚合物粒子载药体系进行了药物递送效果的对比,为聚多巴胺纳米微球表面分子印迹产物在生物医药领域的应用提供了一定参考。本论文研究工作主要有以下两部分。一、聚多巴胺纳米微球在含氧的碱性环境下,多巴胺能够通过氧化自聚合形成PDA NPs。本实验探究了反应介质、溶液pH值、反应时间、多巴胺浓度等实验影响因素对制备PDA NPs的影响。利用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、纳米激光粒度仪(DLS)观察聚多巴胺纳米微球的粒径大小和表面形貌,实验结果证实得到了尺寸可控,且具有良好分散性的PDA NPs。通过紫外分光光度仪证实,多巴胺反应后的上清液仍具有反应活性。亲水性评价实验表明,聚多巴胺具有良好的亲水性和二次反应活性。体外细胞毒性实验证实,浓度低于100μg/m L的PDA NPs对3T3细胞几乎没有细胞毒性。此外,还对不同粒径的PDA NPs进行了血液相容性评价,实验结果表明,浓度相同时,粒径较小的PDA NPs具有更好的血液相容性。本章实验结果为粒径可控,分散性良好的聚多巴胺纳米微球的制备及生物医药领域的应用提供了数据支持,同时为后期聚多巴胺纳米微球表面分子印迹实验打下了坚实的基础。二、表面分子印迹产物在本实验中,我们尝试了一种新的分子印迹方法,即在聚多巴胺纳米微球的表面进行模型药物的分子印迹反应,该反应中选用溶菌酶作为模板分子,多巴胺作为功能单体。通过在吸附有溶菌酶的内核材料(PDA NPs)表面形成聚多巴胺涂层,将模板分子(溶菌酶)包埋在聚多巴胺涂层中,除去模板分子后即得到表面有印迹空穴的表面分子印迹产物,并利用扫描电镜、透射电镜、纳米激光粒度仪、红外光谱仪对相关产物进行了物理和化学表征。模板分子吸附实验表明,溶菌酶能够吸附到PDA NPs的表面。表面涂覆实验证实,聚多巴胺涂层厚度随浸泡时间的增加而增大,同时也随浸泡液浓度的增加而增大。载药实验证实,表面分子印迹产物载药量大于非分子印迹产物,且能对模型药物进行特异性识别。药物递送效果对比实验表明,表面分子印迹产物具有更好的缓释性能。以上实验为蛋白质等生物大分子药物的分子印迹提供了新的思路。
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