rhbFGF、rhIGF-I与人工骨复合促进犬牙周组织再生的实验研究

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目的:本实验通过人工构建5只杂种犬慢性牙周病模型,继而将重组人碱性成纤维细胞生长因子(Recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)和重组人胰岛素样生长因子(Recombinant human insulin-like growth factor-I,rhIGF-I)分别及共同与人工骨(Bio-oss)复合,植入犬Ⅱ度根分叉牙周病模型,并配合引导性组织再生术(Guided issue regeneration,GTR)的治疗。观察分析动物模型的牙周组织修复和再生情况,并探讨两种生长因子对促进牙周组织再生的作用及效果,为其在牙周病临床治疗中的应用提供理论依据。方法:1.动物模型的建立及分组:选用健康、成年杂种犬5只,将形成的慢性Ⅱ度根分叉病变的上下颌第2、3、4前磨牙,共计48颗牙,随机分为5组,包括3个实验组,1个对照组和1个空白对照组,实验组A:rhbFGF/rhIGF-I/Bio-oss/GTR;实验组B:rhbFGF/Bio-oss/GTR;实验组C:rhIGF-I/Bio-oss/GTR;对照组D:单纯GTR手术;空白对照组E:翻瓣术。2.分别在rhbFGF和/或rhIGF-I复合人工骨的植入术前及术后12周记录颊侧根分叉部位的牙周探诊深度(periodontal depth,PD)和附着水平(attachment level,AL);术后2、4、12周拍摄X光片,观察牙槽骨新生情况。3.术后12周处死实验犬,制取实验区组织块(含牙、牙槽骨、牙周膜)进行切片,HE、Masson染色和组织学测量,观察牙周组织(牙槽骨、牙骨质和牙周膜)的新生情况。结果:1.临床检查:术后12周犬模型病变区的PD和AL均有不同程度改善,依次为A、B/C、D和E组;2.X线检查:实验组A、B、C牙槽骨几乎充满前磨牙的根分叉,并可见较清晰的骨硬板;对照组D新生骨量较实验组少,而多于对照组E;对照组E由少量稀疏骨小梁充填在缺损底部,骨密度较低,骨硬板模糊;3.组织学观察:3.1 HE染色可见,实验组A、B、C缺损区可见新生牙槽骨充填根分叉区,其成骨密度较高,钙化良好;新生的牙周纤维细小稠密、富含血管,其方向与根面垂直或接近垂直;新生牙骨质覆盖根分又大部分区域;实验组均未见骨粘连和根吸收等不良愈合。对照组D有部分新生的牙槽骨,呈层状较成熟,牙骨质覆盖根面并向冠方延伸;在牙周间隙内有纤维穿行。对照组E仅有个别缺损区出现少量的新生牙槽骨,且其上方有较多的上皮细胞和非骨性结缔组织覆盖。3.2 Masson染色可见,实验组A、B、C呈现明显的红染区,外周有少量蓝色着染区;对照组DMasson染色为红-蓝相间,骨小梁中心为红色区域:空白对照组E呈现明显的蓝色,周围有少量的红染区。4.组织学测量:实验组新生牙槽骨高度、新生牙骨质高度及新生牙周组织的指标均高于对照组及空白对照组(P<0.05),各实验组相比较,A组的各指标虽在数值上较B、C组略高,但统计学分析,三组均无显著性差异(P>0.05)。结论:1.通过人工制备犬根分叉部位的骨缺损并辅以稳定的局部刺激因素的方法,可以制备出可靠的、近似于临床的犬牙周病Ⅱ度根分叉病变动物模型,以用于各种牙周组织再生治疗的动物实验研究。2.通过对动物模型的临床检查、组织学观察、组织学测量,结果证明rhbFGF和/或rhIGF-I与Bio-oss复合材料具有良好的骨引导性和骨诱导性,用于犬Ⅱ度根分叉缺损的修复可明显促进牙周组织再生(牙槽骨牙骨质的再生及牙周新附着的形成)。3.本实验的结果证明应用rhbFGF和/或rhIGF-I与人工骨复合材料对犬牙周病Ⅱ度根分叉病变模型的牙周组织再生优越于单纯的引导性牙周组织再生术。4.本实验结果分析表明单独应用rhbFGF、rhIGF-I和此两种生子因子联合应用对牙周组织再生的质量上无显著性差异。
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