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研究背景：嵌合抗原受体(CAR)修饰的T细胞显示出的靶向性、杀伤活性和持久性为过继性细胞免疫治疗注入了新的解决方案。目前,许多关于CAR-T治疗肿瘤的临床试验正在进行,并且取得了一些可喜的成果。肿瘤抗原的选择对于CAR-T细胞的治疗效果具有一定的影响。由于肿瘤干细胞在肿瘤的快速生长和转移的过程中起着重要的作用,因此我们想探讨靶向肿瘤干细胞抗原EpCAM是否可以产生显著的抗肿瘤效应。方法：我们首先构建了靶向EpCAM的嵌合抗原受体(EpCAM.CAR)的逆转录病毒载体pLNCX-EpCAM.CAR以及携带luciferase的逆转录病毒载体pLNCX-LUC2,并采用Takara的逆转录病毒包装试剂盒包装出相应的病毒。pLNCX-LUC2病毒感染Hela、Huh7、PC3和PC3M细胞,筛选出稳定表达luciferase的肿瘤细胞克隆用于后续的体内外实验。luciferase生物发光法检测人外周血淋巴细胞(PBL)对EpCAM+肿瘤细胞的体外杀伤作用。应用PC3M腹腔种植NOD-SCID小鼠的肿瘤模型来检测转导pLNCX-EpCAM.CAR病毒颗粒的健康人外周血淋巴细胞(PBL-CAR)对肿瘤生长的体内抑制作用;应用PC3在NOD-SCID小鼠的人工肺转移模型来检测PBL-CAR对肿瘤转移能力的抑制作用。结果：(1)我们成功构建了靶向肿瘤干细胞抗原EpCAM的嵌合抗原受体pLNCX-EpCAM.CAR,包装好病毒颗粒,并成功转导至PBL中,转导效率为52.4%；(2)PC3细胞EpCAM阳性率约13%,且EpCAM+/PC3细胞生长速度明显比EpCAM-/PC3生长速度快；PC3M细胞EpCAM阳性率约98%,且PC3M是PC3细胞中具有高转移能力的细胞克隆,提示EpCAM可能与前列腺癌的转移相关；(3)我们在体外应用生物发光法检测PBL-CAR对前列腺癌细胞PC3和PC3M的杀伤作用：PBL-CAR对EpCAM阴性的Hela细胞无特异性杀伤,对EpCAM阳性的PC3M细胞及EpCAM部分阳性的PC3和Huh7产生特异性杀伤,并呈剂量依赖性。当PC3M细胞与PBL-CAR共培养时,PC3M显著刺激PBL-CAR增殖；(4)在PC3M腹腔种植NOD-SCID的肿瘤模型中,PBL-CAR能够显著抑制PC3M腹腔肿瘤的生长；(5)在PC3人工肺转移肿瘤模型中,PBL-CAR能显著抑制肺转移和骨转移,延长NOD-SCID的生存期。结论：我们的数据显示PBL-CAR能显著抑制前列腺癌的生长与转移,提示靶向EpCAM或其他肿瘤干细胞抗原的过继性T细胞治疗在肿瘤的治疗中具有很大的潜能。目的：三阴乳腺癌是指雌激素受体、孕激素受体和HER2/neu均不表达的乳腺癌,被认为是一种独立的临床病理类型,是以侵袭性强、预后差为主要特征的乳腺癌。目前没有很好的治疗方法。本研究以小鼠4T1乳腺癌模型模拟人的三阴乳腺癌探讨了射频消融对免疫系统的影响以及对原位癌及转移癌的控制情况。方法：5×104/50μl小鼠4T1细胞系皮下接种于雌性Balb/C小鼠右腿处,接种14天后,肿瘤直径达到6-8mm左右时进行射频消融治疗,并在治疗后不同时间点处死小鼠,检测脾脏中各淋巴细胞亚群的变化。治疗14天后,处死对照组和治疗组小鼠,观察肺转移结节的数目。流式细胞术检测脾脏各淋巴细胞亚群的变化。结果：射频消融基本上可以消除原位肿瘤,原位肿瘤复发率较低；射频消融后,小鼠脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞、NK细胞及NKT细胞数量都有所升高；射频消融能够显著抑制4T1肺转移的发生(P<0.05),并且这一现象与脾脏中CD4+T、CD8+T、B细胞及NK细胞的比例增加及MDSC比例降低有关。结论：射频消融增强了机体内抗肿瘤免疫反应,抑制了小鼠4T1乳腺癌肺转移的发生,提示射频消融在治疗三阴乳腺癌及控制其远端转移方面可能会有良好的治疗效果。