目的:1.从RNA和蛋白水平比较一氧化氮通路分子精氨酸酶2（Arg2）,一氧化氮合酶1（NOS1）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1a（PGC-1α）在克山病患者和病区健康对照外周血中的表达,为克山病损伤机制提供线索。2.H₂O₂诱导AC16心肌细胞建立氧化损伤细胞模型,探索损伤模型中一氧化氮通路分子表达及不同水平硒对其的影响,以期为克山病预防提供理论依据。材料与方法:1.提取16例克山病患者和16例健康对照外周血总RNA和总蛋白,qPCR和Western Blot检测克山病人及健康对照外周血NOS1、Arg2及PGC-1αmRNA及蛋白的表达。2.用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）检测克山病患者和健康对照全血中硒含量。3.培养人AC16心肌细胞系,并将其随机分为正常对照组、H₂O₂组（200μmol/L）、0.05μmol/L Se+H₂O₂组、0.5μmol/L Se+H₂O₂组和2μmol/L Se+H₂O₂组,光学倒置显微镜观察细胞形态、生长情况。4.采用MDA试剂盒、NO试剂盒和ATP试剂盒分别测定各组AC16心肌细胞中MDA、NO和ATP含量。5.Western Blot检测各干预组心肌细胞中Arg2,NOS1和PGC-1α蛋白的表达。6.应用透射电镜观察对照组、H₂O₂组、2μmol/L Se+H₂O₂组心肌细胞线粒体结构。7.利用统计分析软件SPSS 23.0分析实验数据,定量资料用均数±标准差来表示,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.克山病患者外周血中Arg2、NOS1和PGC-1αmRNA表达水平与健康对照无差异（P>0.05）;克山病患者外周血中Arg2、NOS1和PGC-1α蛋白水平显著高于健康对照（P<0.05）。2.克山病患者全血中硒含量为97.04±41.33μg/L,健康对照外周血中硒含量为123.89±44.49μg/L,病例组与对照组外周血中硒含量差异无统计学意义（P=0.148）。3.AC16心肌细胞在体外培养下呈贴壁生长,多为长梭形、多角形、不规则形,细胞核清晰,呈卵圆形,位于细胞质中央。4.H₂O₂作用于AC16心肌细胞后,可使心肌细胞MDA和NO含量升高、ATP生成量降低,适量（2μmol/L）补硒后,细胞中MDA和NO含量降低,ATP生成量显著升高（P<0.05）。5.H₂O₂诱导AC16心肌细胞中Arg2蛋白表达水平显著升高,适量（2μmol/L）补硒后显著降低（P<0.05）。6.H₂O₂可引起AC16心肌细胞超微结构的改变,包括线粒体肿胀、变形,线粒体嵴溶解、甚至消失,心肌细胞死亡或凋亡。适当补硒可以减轻细胞的超微结构的损伤。结论:1.一氧化氮信号通路有关的分子Arg2,NOS1和PGC-1α异常表达,影响线粒体生物合成,可能在克山病的发病、发展机制中起重要作用。2.H₂O₂可诱导细胞线粒体损伤、精氨酸酶2表达增加,硒可有效对抗该损伤,维持线粒体结构和功能的完整性。