云南部分野生小型哺乳动物及广西家犬肉孢子虫的形态及分子特征

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2017年3月-2018年12月,在云南省昆明市、大理州、迪庆州、德宏州和楚雄州的35个采样点共采集各种野生小型哺乳动物肌肉样品1153份,包括啮齿类23种1037份,食虫目4种96份,树鼩目1种20份;2017年10月,在广西壮族自治区玉林市农贸市场采集37份源于不同个体的家犬肌肉样品。在1153份源于不同个体的野生小型哺乳动物的肌肉样品中,检查到有肉孢子虫感染的计193份,自然感染率为16.74%(193/1153),共鉴定出8种肉孢子虫:(1)黄毛鼠肉孢子虫新种(Sarcocystis losea n.sp.),中间宿主包括黄毛鼠(Rattuslosea)、黄胸鼠(R.flavipectus)和褐家鼠(R.norvegicus)。光镜下包囊突起长指状,电镜下突起呈栅栏状,内无微管,包囊壁电镜类型为“10”型;GenBank中与其18SrDNA基因相似性最高的是鼠属(Rattus)的左氏肉孢子虫(S.zuoi)(平均相似度98.24%);与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(Pantherophis alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystissp.)(平均相似度:94.97%)。(2)西姆里肉孢子虫(S.cvmruensis),中间宿主包括屋顶鼠(R.rattus)、褐家鼠(R.norvegicus)、斑胸鼠(R.yunnanensis)、黄胸鼠(R.flavipectus)和大足鼠(R.nitidus),光镜下该肉孢子虫包囊壁光滑,电镜下有小山丘状突起,包囊壁电镜类型为“Ⅰ型;GenBank中与其18S rDNA序列相似性最高的是屋顶鼠肉孢子虫(S.ratti)(平均相似度:99.96%);与其线粒体COX1基因序列相似度最高的是西姆里肉孢子虫(S.cymruensis)(平均相似度:95.26%)。(3)社鼠肉狍子虫新种(S.confucianus n.sp.),中间宿主包括社鼠(Niviventer confucianus)和黄胸鼠(R.flavipectus),光镜下肉孢子虫包囊具有倾斜指状突起,电镜下突起有时候呈“T”型或者“蘑菇”型,突起内无微管,包囊壁电镜类型为“27”型;GenBank中与其18S rDNA基因相似性最高的是左氏肉孢子虫(S.zuoi)(平均相似度:97.14%);与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(P.alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystis sp.)(平均相似度:95.15%)。(4)左氏肉孢子虫(S.zuoi),中间宿主包括褐家鼠(R.norvegicus)、斑胸鼠(R.yunnanensis)、大足鼠(R.nitidus)和屋顶鼠(R.rattus),光镜下包囊具有倾斜长指状突起。(5)齐氏肉孢子虫新种(S.chevieri n.sp.),中间宿主为齐氏姬鼠(Apodemus chevieri),光镜下包囊壁光滑,电镜下包囊壁表面小有的不规则的突起,包囊壁电镜类型为“18”型;GenBank中与其18SrDNA基因相似性最高的是在日本野生浣熊(Procyon lotor)血液中检测到的一种肉孢子虫未定种(Sarcocystis sp.)(平均相似度:98%);与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(P.alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystis sp.)(平均相似度:99.57%)。(6)绒鼠肉孢子虫(S.eothenomysi),中间宿主为小亚细亚绒鼠(Eothenomys miletus),光镜下包囊壁光滑;GenBank中与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(P.alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystis sp.)(平均相似度:99.8%)。(7)(?)肉孢子虫(S.clethrionomyelaphis),中间宿主为小亚细亚绒鼠(E.miletus),光镜下包囊具有短指状突起;GenBank中与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(P.alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystis sp.)(平均相似度:94.47%)。(8)灰麝鼩肉孢子虫新种(S.attenuata.n.sp.),中间宿主为灰麝鼩(Crocidura attenuata),光镜下包囊具有舌状或花瓣状突起,电镜下突起形态不规则,内无微管,包囊壁电镜类型为“9”型;GenBank中与其18SrDNA基因相似度最高的是在左氏肉孢子虫(S.zuoi)(平均相似度:94.47%);与其线粒体COX1基因相似度最高的是以东方鼠蛇(P.alleghaniensis)为终末宿主的1种未命名肉孢子虫(Sarcocystis sp.)(平均相似度:95.18%)。广西玉林市售犬肉的犬肉孢子虫(S.caninum)自然感染率为5.4%(2/37),光镜下包囊壁有楔形小突起,电镜下突起呈不规则的网状,基质层厚,包囊壁电镜类型为“9型”。GenBank中与其18S rDNA、28S rDNA、线粒体COX1基因、ITS-1基因和RpoB基因相似度最高的是狐和狼的北极肉孢子虫(S.arctica),对应的平均相似度分别为:99.98%、99.98%、99.8%、99.91%,和99.68%。基于分子系统进化分析,本次实验在小型哺乳动物肌肉内发现并命名的4个新物种:寄生于黄毛鼠(R.losea)、黄胸鼠(R.flavipectus)和褐家鼠(R.norvegicus)的黄毛鼠肉孢子虫新种(S.losea n.sp.)、寄生于齐氏姬鼠(A.chevieri)的齐氏肉孢子虫新种(S.chevieri n.sp.)、寄生于社鼠(N.confucianus)和黄胸鼠(R.flavipectus)的社鼠肉狍子虫新种(S.confucianus n.sp.)和寄生于灰麝鼩(C.attenuata)的灰麝鼩肉孢子虫新种(S.attenuata n.sp.)都与终末宿主为蛇的肉孢子虫聚群在一起,推测其终末宿主极有可能是蛇类;家犬肌肉中的犬肉孢子虫(S caninum)与终末宿主为猛禽的肉孢子虫聚群在一起,提示其终末宿主亦有可能是鸟类。
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