【摘 要】
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目的:研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)抑制对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)引起的巨噬细胞炎症。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,不同浓度的PEDF(100、200、400、800ng/mL)处理细胞24h,用CCK-8法检测细胞毒性;ox-LDL组:建立ox
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目的:研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)抑制对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)引起的巨噬细胞炎症。方法:体外培养RAW264.7巨噬细胞,不同浓度的PEDF(100、200、400、800ng/mL)处理细胞24h,用CCK-8法检测细胞毒性;ox-LDL组:建立ox-LDL诱导的巨噬细胞炎症模型,80mg/Lox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞炎症前,给予100,200,400 ng/mLPEDF预处理1 h,分别用CCK-8法和LDH试剂盒检测细胞活力,Western blot技术和ELISA试剂盒检测细胞内外单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)、白介素-1(Interleukin-1,IL-1)表达水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;LPS组:建立LPS诱导的巨噬细胞炎症模型,1 mg/LLPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症前,给予400 ng/mL PEDF预处理1 h,检测内容同ox-LDL组。结果:100、200、400ng/mL浓度PEDF对RAW264.7巨噬细胞无明显细胞毒性作用,800 ng/mL浓度PEDF对RAW264.7巨噬细胞有明显细胞毒性作用。在ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型基础上进行PEDF干预,结果显示PEDF干预组与ox-LDL模型组相比细胞活力呈浓度依赖性降低,而细胞凋亡情况呈浓度依赖性加重(P<0.05),且PEDF干预组能显著抑制ox-LDL所诱导的IL-1、MCP-1、TNF-α炎性因子的上调,且呈浓度依赖性(P<0.05)。在LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型基础上进行PEDF干预,得到相似结果。结果显示PEDF干预组与LPS模型组相比细胞活力降低,细胞凋亡加重,抑制LPS所诱导的RAW264.7巨噬细胞IL-1、MCP-1、TNF-α炎性因子的上调(P<0.05)。结论:PEDF能够减轻ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应,且在促进巨噬细胞凋亡的同时下调ox-LDL诱导的IL-1、MCP-1、TNF-α炎性因子的表达,这可能为PEDF促进巨噬细胞凋亡进而减轻炎症反应提供依据。
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