利用抗肿瘤药靶-酪氨酸激酶从广西特色中草药中筛选和研究选择性抗肿瘤药

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:linsl2003
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目的:
  利用抗肿瘤药靶-酪氨酸激酶从18种广西常用中草药(瑶药、壮药)中筛选和研究选择性抗肿瘤药物
  方法:
  醇提取十八种广西特色中草药(其中瑶药8种,壮药10种),采用MTT法测定其体外对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用;选取体外抑瘤作用较好的药物,根据血清药理学方法制备含药血清,观察其体外对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用;通过细胞裂解液提取不同作用时间不同作用剂量下的人肝癌细胞SMMC-7721总蛋白,采用ELISA法测定人肝癌细胞SMMC-7721总蛋白中酪氨酸激酶(TPK)含量,观察不同药物提取物对其含量影响;通过建立鸡胚绒毛尿囊膜模型测定不同药物提取物抗血管生成的抑制作用;建立人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤模型,观察不同药物治疗组对裸鼠移植瘤的影响,HE染色观察肿瘤生长及其血管生长情况,免疫组化法检测瘤组织中VEGF、CD34的表达。
  结果:
  在筛选的特色药物中,瑶药2号、瑶药5号体外抑制人肝癌SMMC-7721的作用较强,IC50分别为0.080mg/ml,0.281mg/ml;血清药理学实验结果显示瑶药2号、瑶药5号、索拉菲尼的含药血清均显示出不同程度的体外抗肿瘤作用,其中10%瑶药2号含药血清组抑瘤作用与10%索拉菲尼含药血清组相比,抑制率为11.15%,抑制作用变强(P<0.05);瑶药2号、瑶药5号可不同程度的降低酪氨酸激酶的含量(P<0.01);12.5mg/L索拉菲尼、50mg/mL瑶药2号、12.5mg/mL-50mg/mL瑶药5号均有不同程度的抑制鸡胚尿囊血管生长作用,与空白对照组相比,索拉菲尼对各级血管均有明显抑制作用(P<0.01),瑶药2号高剂量组对二、三级血管有抑制作用(P<0.01),瑶药5号对三级血管有抑制作用,高剂量时可同时抑制一、二级血管(P<0.01);索拉菲尼组,瑶药2号高剂量组、瑶药2号中剂量组肿瘤瘤重、相对体积明显低于阴性对照组(P<0.01),其抑瘤率分别为51.75%,47.71%,21.27%;HE染色显示索拉菲尼组、瑶药2号高剂量组肿瘤坏死区域明显大于阴性对照组;索拉菲尼组、瑶药2号高剂量组MVD明显低于阴性对照组(P<0.01),瑶药2号中剂量组与阴性对照组相比也有差异(P<0.05);索拉菲尼组、瑶药2号高剂量组可明显降低肿瘤组织内VEGF的表达(P<0.01)。
  结论:
  瑶药2号、瑶药5号均可不同程度的抑制血管生长,可降低肿瘤细胞内酪氨酸激酶的含量。此外,瑶药2号还可降低肿瘤内微血管密度以及VEGF的表达。
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